生物化学实验 (72).pdf

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ANALYTICALBIOCHEMISTRY19,76-85(1985)

MeasurementofProteinUsingBicinchoninicAcid’

P.K.SMITH,*R.I.KROHN,G.T.HERMANSON,A.K.MALLIA,F.H.GARTNER,

M.D.FROVENZANO,E.K.FUJIMOTO,N.M.GOEKE,B.J.OLSON,ANDD.C.KLENK

BiochemicalResearchDivision,PierceChemicalCompany,P.O.BoxI17,Rockford,Illinois61IO5

ReceivedApril30,1985

Bicinchoninicacid,sodiumsalt,isastable,water-solublecompoundcapableofformingan

intensepurplecomplexwithcuprousion(Cu’+)inanalkalineenvironment.Thisreagentforms

thebasisofananalyticalmethodcapableofmonitoringcuprousionproducedinthereactionof

proteinwithalkalineCu2+(biuretreaction).Thecolorproducedfromthisreactionisstableand

increasesinaproportionalfashionoverabroadrangeofincreasingproteinconcentrations.When

comparedtothemethodofLowryetal.,theresultsreportedheredemonstrateagreatertolerance

ofthebicinchoninatereagenttowardsuchcommonlyencounteredinterferencesasnonionicde-

tergentsandsimplebuffersalts.Thestabilityofthereagentandresultingchromophorealsoallows

forasimplified,one-stepanalysisandanenhancedflexibilityinprotocolselection.Thisnew

methodmaintainsthehighsensitivityandlowprotein-to-proteinvariationassociatedwiththe

Lowrytechnique.01985AcademicFPLS,hc.

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