分光光度计简介.ppt

第三节可见分光光度法一.分光光度计二.测定方法一、分光光度计分光光度计四大系统光源系统检测器吸收池分光系统数据处理器1.光源系统：提供波长范围为360~1000nm的连续光谱。可见光光源为钨灯，要求强度高，稳定性好。2.分光系统：提供所需波长的单色光。单色器由狭缝、光栅和准直镜组成，要求适当宽度的狭缝，以保证单色光光强和纯度。3.吸收池：用来盛放溶液的容器。可见光区用光学玻璃，要求光洁、透明、相互匹配。4.检测系统：进行光电转换、信号放大及输出。由光电管、放大器、指示器、数字显示器和打印器等装置构成二、测定方法可见-紫外分光光度法主要用于定量分析。（一）标准曲线法——根据Lambert-BeerLaw，以该物质吸收光谱图中的?max为入射光，测定被测物质标准品配制的一系列浓度溶液的A。以A为纵坐标，以溶液浓度为横坐标，可得一条通过坐标原点的直线。然后，在相同的实验条件下测定被测液的A，在标准曲线上查出被测液的浓度。c（mg/L）A?=550nm40801202000.60.40.20.0为消除溶剂或其他有色物质对入射光的吸收，消除光在溶液中的散射和比色皿对光的反射等的因素的影响，必须采用空白溶液作对照。测定时，首先将空白溶液置于光路，调节仪器的“Zero”键，使A=0或T=100%，然后开始测定标准溶液或被测液的A。1.溶剂空白——除被测物以外，其他溶剂均为无色时，可用溶剂作空白溶液。2.试剂空白——显色剂有色时，按显色条件加入各种试剂和溶剂，只是不含有被测物的标准品。空白溶液（二）标准对照法——根据Lambert-BeerLaw，以该物质吸收光谱图中的?max为入射光，首先配制一个与被测溶液浓度相近的标准溶液cS，测其AS，再将样品溶液推入光路，测其AX，则试样溶液的浓度cX为：此法适于非经常性的分析工作，准确度不如标准曲线法。