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常规PCR技术及几类PCR技术的介绍热启动PCR
热启动PCR是除了好的引物设计之外,提高PCR特异性最重要的方法之一。尽管TaqDNA聚合酶的最正确延长温度在72℃,聚合酶在室温仍旧有活性。因此,在进展PCR反响配制过程中,以及在热循环刚开头,保温温度低于退火温度时会产生非特异性的产物。这些非特异性产物一旦形成,就会被有效扩增。在用于引物设计的位点由于遗传元件的定位而受限时,如site-directed突变、表达克隆或用于DNA工程的遗传元件的构建和操作,热启动PCR尤为有效。
限制TaqDNA聚合酶活性的常用方法是在冰上配制PCR反响
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