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Ad5/35mCD20载体的构建及鉴定的开题报告
一、研究背景
多个学科领域中,生物技术发展迅速,为人类解决了许多实际问题,催生了大量新技术。其中,重组蛋白相关技术已经广泛应用于生物医药领域,在研制药物、治疗和预防疾病等方面发挥着重要作用。重组人源单克隆抗体(mAbs)是生物制药领域中的一种常见的药物,可以被开发用于治疗各种疾病如癌症、自身免疫性疾病等。
对于生物医药领域中大规模制备单克隆抗体的研究而言,使用哺乳动物细胞系统表达与分泌抗体是一种非常经典的方法。在此过程中,mCD20是一种非常重要的抗原,它广泛出现在B细胞的细胞表面,并成为一些抗体药物的靶点。因此,本论文的研究目标是构建和鉴定一种用于mCD20蛋白表达的载体系统,从而可以实现B细胞表面抗原mCD20蛋白的大规模制备。
二、研究方法
1.计划使用Ad5/35mCD20载体来实现mCD20蛋白的表达,这是一种基于二代腺病毒载体系统的表达方式。该载体在承载mCD20蛋白的同时,也具有附加剂(adjuvant)的作用,能够在表达过程中提高抗原的免疫原性,从而增强结果。
2.通过PCR技术从哺乳动物细胞中提取mCD20基因序列并对其进行切割,随后将其接入到载体中,最后采用过表达方式得到mCD20蛋白。
3.利用Westernblotting、ELISA等方式对所有重组蛋白表达情况进行鉴定。确保生成的蛋白质与mCD20是等同的,并分析蛋白的纯度和质量。
三、预期结果
1.构建成功一个稳定的Ad5/35mCD20载体表达系统
2.成功表达出高质量的mCD20蛋白,并验证蛋白的纯度和质量
3.解决质量波动的问题
4.验证Ab2。
四、研究意义
由于先前缺乏mCD20蛋白生产方案,因此本论文的研究为抗CD20抗体(Ab2)的开发和预防CD20-阳性B细胞瘤的治疗提供了一种解决方案。本论文的研究结果可推动生物医药领域的发展,并有望改善许多人的健康状况。
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