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RASSF1A与肺癌A549细胞对顺铂敏感性关系的研究的开题报告

开题报告

题目：RASSF1A与肺癌A549细胞对顺铂敏感性关系的研究

研究背景：

肺癌是当前全球死亡率最高的恶性肿瘤之一，其中非小细胞肺癌占比较大。顺铂是常用的肺癌化疗药物之一。然而，随着顺铂的广泛应用，许多患者出现耐药现象，因此研究肺癌患者对顺铂的敏感性及其调节因素对于临床治疗有重要意义。

RASSF1A（Rasassociationdomainfamily1isoformA）是一种肿瘤抑制基因，其在多种癌症中表达降低或失活，与肺癌的发生、发展及临床预后密切相关。

研究目的：

本研究旨在探究RASSF1A与肺癌A549细胞对顺铂敏感性之间的关系及其机制。

研究方法：

1.细胞培养：采用传统的细胞培养方法，将A549细胞以密度为1×10^6个/ml的方式接种于含10%胎牛血清的DMEM中，并在5%CO2、37℃下孵育。分别加入0、5、10、20、40、80、160μmol/L顺铂进行耐药试验。

2.RNA干扰：通过RNA干扰技术，选取siRNA克隆进行转染，降低RASSF1A表达水平，Westernblotting检测转染效率。

3.MTT法：细胞按照以下处理方法进行实验：1）仅加入RASSF1AsiRNA；2）仅加入顺铂；3）加入RASSF1AsiRNA和顺铂；4）加入对照物，测定细胞的增殖、存活情况并计算细胞的IC50值。

4.Westernblotting：Westernblotting检测RASSF1A和凋亡相关蛋白的表达变化。

预期结果：

1.A549细胞对顺铂的敏感性逐渐下降，通过计算IC50值确定顺铂敏感程度。

2.RASSF1AsiRNA转染后A549细胞对顺铂的敏感性下降，IC50值升高。

3.RASSF1AsiRNA干扰后，凋亡相关蛋白表达变化，预示着RASSF1A与细胞凋亡途径相关。

结论：

本研究结果将探究RASSF1A与肺癌A549细胞对顺铂敏感性之间的关系及其机制，为深入研究RASSF1A作为肺癌敏感性调控因子的研究提供一定的理论基础，有助于满足临床对肺癌生物学开展的要求，推进肺癌的临床治疗和预后。