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第5章DNA复制

(Chapter4DNAReplication);Chapter4DNAReplication（DNA复制）;第一节DNA复制概述

(DNAReplication:AnOverview);一、基本概念;;;;二、DNA的半保留复制

（Semi-ConservationReplication）;;DNA复制的两种模型;Semi-conservativemechanismwasdemonstratedexperimentallyin1958byMeselsonandStahl--------Proof1;CsCl(Cesiumchloride)densitygradientultracentrifugation（CsCl密度梯度超离心）

LabeledE.ColiDNAwith15N14N;;DNAreplication;DNAreplication;15N标记实验;DNA复制概述;三、复制起点、方向和方式;AllprokaryoticchromosomesandmanybacteriophageandviralDNAmoleculesarecirclesandcomprisesinglereplications.（单复制子）;真核生物（Eukaryote）:多复制起点，即－－一个genome中有多个复制单位;ATrich;2、复制方向（复制过程的顺序性）;;;真核生物的多复制子多个复制眼;ElectronMicroscopyofreplicatingDNArevealsreplicatingbubbles.;单向复制;;3、复制方式;DNA复制方式;（1）从新起始（denovoinitiation）或复制

叉式（replicationfork）或θ复制;双向复制;线粒体和叶绿体DNA的复制方式

两条链上的复制起点不对应时产生D-环复制。;由于复制时产生的滚环结构形状象σ(sigma)，又称σ复制

病毒、细菌因子;双螺旋环状亲代DNA;四、DNA复制的半不连续性

（Semi-DiscontinuousReplication）;;E.coli[t-];H3-T;---A----

---T----;U;;前导链

(dUMP片段长度);;;第二节DNA复制的酶学

EnzymologyofDNAReplication;DNA复制的体系;第二节DNA复制的酶学

(EnzymologyofDNAReplication);一、DNA聚合酶;(一)DNA聚合酶催化的反应;1、5′至3′的聚合活性;hydroxylgroupat3’endofgrowingchain;;;2、3’－5’外切核酸酶活性

校对功能(proofreading);;3、5’－3’外切核酸酶活性;P;DNA聚合酶I的切口平移反应（Nicktranslation);1957ArthurKornberg首次发现

Infact,thereare5polymerasestodate,althoughwewillfocusonlyon3

DNApolⅠ

DNApolⅡ

DNApolⅢ;1.DNAPolymeraseI;DNApolⅡ：5`→3`聚合酶活性及3`→5`外切核酸酶活性。

DNApolⅢ:由10种亚基(αβγδδ’εθτχψ)组成不对称异源二聚体。

核心酶（αεθ）;DNApolⅢ;DNApolⅢ各亚基的功能;?亚基形成一个围绕DNA的环状钳;;3.三种大肠杆???DNA聚合酶特性之比较;三种大肠杆菌DNA聚合酶的

主要功能;三种DNA聚合酶在决定DNA合成

方面的共同特性;已知的DNA聚合酶只能使链按5’－3’方向生长;+;+;费时、费能、增加脱磷酸、加磷酸的能量消耗;（三）真核生物的DNA聚合酶;─────────────────────

DNA聚合酶

性质----------------------------------------------

αβγδε

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