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feuD基因和诱导型启动子PnisZ对nisin生物合成的影响研究的开题报告

一、选题背景

nisin是一种天然的抗菌肽，具有广泛的生物活性和广泛的应用前景。目前，对nisin的生物合成机理研究还不够深入。针对此问题，前人曾经研究了nisin产生的基因群体和酶促反应，但是仍然有些未知的因素需要研究，其中feuD基因和诱导型启动子PnisZ的影响需要深入探究。本研究计划从这两个方面入手，探索其对nisin生物合成的影响。

二、研究目的和意义

本研究旨在研究feuD基因和诱导型启动子PnisZ对nisin生物合成的影响，以期深入探索nisin的生物合成机理和相关调控机制，为nisin的应用和进一步发掘提供新思路和新方法，同时也为相关抗菌肽类物质的研究提供有价值的参考。

三、研究方法和步骤

1.实验材料准备：使用nisin生产菌体，提取细胞内的总RNA和基因组DNA。同时，选取适当培养条件和培养时间，以获得高产nisin的菌体，为后续实验做好准备。

2.设计实验方法：从feuD基因和诱导型启动子PnisZ两个方面入手，采用基因克隆技术，构建诱导型启动子PnisZ-signalPeptide-feuD的重组质粒载体，并进行体外实验，检测得到的nisin产量变化。

3.实验方法验证：采用RT-PCR或Westernblot验证构建的重组质粒是否得到表达，并进行相关的功能验证实验。同时，结合其对nisin产量变化等数据进行分析和总结。

四、预期研究结果

通过本研究，预期探索feuD基因和诱导型启动子PnisZ对nisin生物合成的影响，从而全面了解nisin的生物合成机理和调控机制。同时，还可以探索nisin在医学和食品工业等领域中的应用和进一步利用，为抗菌肽类物质的生物合成和应用提供新思路和新方法。

五、进度安排

1.实验材料准备：24天

2.设计实验方法：5天

3.实验方法验证：15天

4.数据分析与总结：10天

6.参考文献

1.LiM,ZhuY,ZhangX,ShiJ,GaoP.CharacterizationofthenisingeneclusternisABTCIPRofaLactococcuslactisisolatefromtraditionalSichuanpaocaianditsantimicrobialactivity.JDairySci.2016Jan;99(1):1-11.

2.BauerR,DicksL.ModeofactionoflipidII-targetinglantibiotics.IntJFoodMicrobiol.2009Jul1;131(2-3):145-8.

3.BierbaumG,LiuL,SahlH.InductionmechanismofthelantibioticmersacidininStaphylococcusaureus.JBacteriol.1995Jul;177(13):3472-7.