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氢氧化钠溶液,c(NaOH)=2mol/L
氢氧化钠溶液,c(NaOH)=2mol/L
m=8g,V=100ml
m=8g,V=100ml
以上试剂配制均缩小
以上试剂配制均缩小10倍
蒸馏水/ml2.1表一标准曲线的测定
蒸馏水/ml
2.1
管号
0
1
2
3
4
5
葡萄糖/mL
0.0
0.02
0.04
0.06
0.08
0.1
蒸馏水/mL
0.1
0.08
0.06
0.04
0.02
0.0
显色液/mL
0.3
0.3
0.3
0.3
0.3
0.3
沸水浴中煮沸显色10min,冷却
以葡萄糖量为横坐标,以吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,获得线性回归方程。线性回归系数应在0.9990以上时方可使用(否则须重做)。
编号酶液/mLCMC/mL
编号
酶液/mLCMC/mL
显色液/mL
空白
0.1(煮沸5-10min)
0.3
50℃恒温30min0.3
沸水浴中煮沸显色10min,冷却
1.8
样品
0.1
0.3
0.3
蒸馏水/ml
图一:标准葡萄糖光吸收曲线
结果分析:拟合所得的标准曲线为:Y=7.439×10-4X-0.00243。拟合度为0.99917。由样品的A值,可得三份溶液的葡萄糖含量分别为:652.5ug,648.5ug,653.9ug。所以平均含量:651.6ug。
纤维素酶活力单位=651.6/0.01×30=2172ug/mg×min
【思考与讨论】
1、在测定时为使各样品和空白管处理一致,应同时加入试剂,同时放入水浴中,同时取出水浴,以使反应得进行程度一致。
2、在测溶液的OD值之前,应将溶液摇匀,摇匀的方法是用保鲜膜蒙住试管口,然后来回震荡试管。
2.纤维素酶液的浓度可根据不同酶制剂的活力而相应调整。如果酶活力高,酶浓度可小些;反之,酶活1.DNS溶液配制时,将含DNS的NaOH溶液加到含酒石酸钾钠的热水溶液中时,一定要慢倒,边倒边搅拌,以防被烫。
2.纤维素酶液的浓度可根据不同酶制剂的活力而相应调整。如果酶活力高,酶浓度可小些;反之,酶活
力低时,酶浓度则大些。
力低时,酶浓度则大些。
3.在测定时,调零用1号管液一定在相应的各管液测定完成后,方可从比色杯中弃掉。
5.用移液管或加液器加各试剂时,不能将移液管或取液枪头混用。
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