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miR--122抑制人乳头瘤病毒E6蛋白的表达及其机理研究的开题报告

题目：miR-122抑制人乳头瘤病毒E6蛋白的表达及其机理研究

研究背景和意义：

人乳头瘤病毒（HPV）是一种常见的性传播病毒，感染HPV容易引发宫颈癌、头颈部癌以及其它恶性肿瘤等。HPV感染的关键在于E6和E7两种蛋白的功能失控，这两种蛋白能够干扰宿主的正常生理功能，从而导致细胞的恶性转化。miR-122是一种miRNA，其在肝脏转录后可以参与胆固醇代谢调控、参与血糖代谢与肝癌形成等方面的调节。同时，miR-122的表达可受到某些病毒的干扰，与病毒感染相关。近来的研究表明，miR-122可以通过干扰E6蛋白的表达，从而发挥对于HPV感染细胞的抑制作用。因此，深入研究miR-122对E6蛋白表达的影响及其机理具有重要的理论和实际意义。

研究内容：

本研究的主要内容包括：

1、构建miR-122靶向E6蛋白的表达载体，利用分子生物学方法将其转染到HPV感染的细胞中，观察E6mRNA和蛋白表达水平的变化。

2、利用半定量PCR等技术手段，研究miR-122的表达与E6蛋白表达的关系，探讨miR-122对E6的靶向作用。

3、通过Westernblot等技术，考察miR-122对E6蛋白的抑制是否可以影响其下游靶向蛋白的表达。

4、结合文献报道，探讨miR-122对HPV感染细胞中相关信号通路的调节作用。

预期研究成果：

通过上述的研究内容，本项目预期取得以下研究成果：

1、明确miR-122对E6蛋白表达的影响及其机理。

2、揭示miR-122与E6蛋白在HPV感染细胞中的相互作用关系。

3、进一步探索miR-122在HPV感染细胞中的调节作用及其可能的下游靶向信号通路。

4、研究成果可为HPV感染细胞的治疗提供新思路。

研究方法：

本项目采用分子生物学、细胞生物学、免疫学等方法，以HPV感染的细胞模型为研究对象，通过转染miR-122靶向E6蛋白的表达载体、对转染后细胞及其对照组进行半定量PCR、Westernblot等技术手段，从而观察miR-122对E6蛋白表达的影响及其机理。同时，通过细胞系的繁殖、流式细胞仪等手段，探讨miR-122对HPV感染细胞的细胞生理、生化过程等方面的调节作用。