《细胞外泌体通用技术要求》.pdfVIP

ICS11.120

CCSC27

团体标准

T/SZJCHXXXX—XXXX

细胞外泌体通用技术要求

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

深圳市健康产业发展促进会  发布

T/SZJCHFORMTEXTXXXX—FORMTEXTXXXX

细胞外泌体通用技术要求

1范围

本文件规定了细胞外泌体的原材料和辅料的分类和信息标识要求、关键质量属性、检验方法、检验

规则，以及标签、贮存方面的要求。

本文件适用于细胞外泌体的生产和检测。

2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件。

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

细胞外泌体

一类由细胞产生和分泌的，由双层脂膜包裹，没有自我复制能力，粒径为40-100nm的来源于内体的

细胞外囊泡。

4原材料和辅料的分类和信息标识要求

4.1原材料和辅料分类

细胞外泌体的制备原料一般包括液体活检和细胞上清两类。

4.2原材料和辅料信息标识要求

4.2.1液体活检类

液体活检类的外泌体原料包括血清、血浆、乳汁、脑脊液、胸/腹腔积液、肺泡灌洗液、尿液、唾

液等，应标明以下信息：

——活体来源，比如人体，何种动物；

——试管类型；

——体积；

——储存温度及时间。

4.2.2细胞上清类

4.2.2.1细胞外泌体原料采用细胞上清的，其原产料及其辅料应标明以下三类信息：

——来源细胞的培养和收货条件；

——细胞培养基的信息；

——收获细胞外泌体时，死亡细胞的百分比。

4.2.2.2来源细胞的培养和收获条件至少应包括以下内容：

——细胞来源；

——传代次数；

——收获时密度；

——培养体积；

——培养器皿；

——培养器皿的表面特性；

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——培养温度；

——培养环境气体浓度(如二氧化碳)；

——是否适用刺激因子；

——收获频率和间隔。

4.2.3细胞培养基的信息至少应包括以下内容：

——培养基名称（如DMEM或者RPMI1640等）；

——培养基中的添加成分（如葡萄糖，抗生素，生长因子等）；

——使用的血清中是否含有细胞外泌体；

——何时转换为无血清培养基。

5关键质量属性

5.1粒径

粒径应为30～100nm。

5.2形态

细胞外泌体的形态根据所用显微镜的不同而显示不同形态，具体要求如下：

a)使用扫描电子显微镜观察的，形态应为碟形或茶托状形态，具体示例见图1；

b)使用冷冻射电显微镜观察的，形态应为双模结构的圆形，具体示例见图2。

图1

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图2

5.3细胞外泌体的表面标志蛋白

以下三组标志蛋白中，第一组和第二组应至少各有一个蛋白呈阳性，第三组蛋白应至少有一个蛋白

呈阴性：

a)第一组为细胞骨架蛋⽩，抗原结合提呈相关蛋⽩：CD9、CD63、CD81、CD82、CD47、HLA-A/B/C、

H2-K/D/Q、ITGA/ITGB、TFR