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实实验验⼀⼀-紫紫外外分分光光光光度度法法测测定定苯苯甲甲酸酸

实验⼀紫外分光光度法测定苯甲酸

⼀、实验⽬的

学习、了解紫外分光光度法原理

了解紫外分光光度计的结构和使⽤⽅法

⼆、实验原理

辐射能（光）通过吸光物质时，物质的分⼦对辐射能选择性的吸收⽽得到的光谱称为分⼦吸收光谱。分⼦吸收光谱的产⽣与

物质的分⼦结构、物质所在状态、溶剂和溶液的PH等因素有关。分⼦吸收光谱的强度与吸光物质的浓度有关。表⽰物质对光

的吸收程度，通常采⽤“吸光度”这⼀概念来量度。

根据朗伯－⽐尔定律，在⼀定的条件下，吸光物质的吸光度A与该物质的浓度C和液层厚度成正⽐。即A＝LC

因此，只要选择⼀定的波长测定溶液的吸光度，即可求出该溶液浓度，这就是紫外－可见分光光度计的基本原理。

在碱性条件下，苯甲酸形成苯甲酸盐，对紫外光有选择性吸收，其吸收光谱的最⼤吸收波长为225nm。因此，采⽤紫外分光

光度计测定苯甲酸在225nm处的吸收度就能进⾏定量分析。

三、仪器与主要试剂

TU-1810紫外可见分光光度计1cm⽯英⽐⾊⽫

0.1M氢氧化钠溶液

苯甲酸(AR)

四、实验步骤

1、苯甲酸标准溶液的制备

称取苯甲酸(105℃烘⼲)100mg,⽤0.1M氢氧化钠溶液100ml溶解后,转⼊1000ml容量瓶中,⽤蒸馏⽔稀释⾄刻度.此溶液1ml含

0.1mg苯甲酸.

2、制作苯甲酸吸收曲线,选择最⼤吸收波长

①移取苯甲酸标准溶液4.00ml于50ml容量瓶中,⽤0.01M氢氧化钠溶液定容,摇匀,此溶液1ml含苯甲酸8ug.

以氘灯为光源,⽤0.01M氢氧化钠溶液作为参⽐,改变测量波长(从210-240nm)测量8ug/ml苯甲酸的吸光度.

②以波长为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制苯甲酸的紫外吸收曲线,并找出最⼤的吸收波长(是否是225nm).

3﹑样品的测定

①取10.00ml苯甲酸样品,放⼊50ml容量瓶中,⽤0.01M氢氧化钠

溶液定容,摇匀.

②在上述曲线中所找到的最⼤吸收波长作为⼊射光波长,以0.01M氢氧化钠溶液作为参⽐,在上述相同条件下测出苯甲酸标准溶

液

(8ug/ml苯甲酸)和稀释好的样品的吸光度,分别记录.

五、分析结果计算

计算样品液中苯甲酸的浓度

C样/C标A样/A标

六、思考题

1、⽐较TU-1810与722S型分光光度计机构有何异同点?

2、本实验为什么要使⽤⽯英⽐⾊⽫?

3、使⽤紫外光源(氘灯)应注意些什么?