10第十章细菌和病毒的遗传gg.pptVIP

霉菌菌落细菌菌落大肠杆菌2、染色体：大都是双链DNA环状结构，长度不等，裸露、无蛋白质结合，也不形成核小体。所以其染色体的显著特点是：易于接受带有相同或不同物种的基因或DNA片段的插入。大肠杆菌(Escherichiacoli)在细菌遗传学研究中应用十分广泛，其DNA主要是以单个主染色体(mainchromosome)的形式存在。＊细胞计数法——估计细胞培养物浓度

培养物中微生物计数方法是微生物学的基本实验技术，其基本思路是：对原培养物进行连续稀释；进行平板涂抹培养；由于每个细胞形成一个菌落，计数菌落数；根据稀释倍数计算原培养物中的细胞浓度。＊纯培养——建立纯系通常采用平板表面涂布法或划线法可以获得单菌落。这种方法获得的纯系，称为“菌种纯”。每个菌落由单个细胞繁殖而来，叫纯系（无性繁殖系）＊选择培养法——鉴定突变型◎筛选鉴定原理：选择培养法是根据菌株在基本培养基和营养培养基上的生长表现将菌株分为原养型和营养缺陷型。原养型：野生菌株,可在基本培养基上生长。营养缺陷型：丧失合成某种营养物质能力，不能在基本培养基上生长，在补充营养培养基上生长。◎筛选鉴定方法：与红色面包霉生化突变型的鉴定方法基本一致。用不同的选择性培养基，测知不同的突变。＊影印培养法——突变型与重组型的批量筛选为高效检测、分离混和群体中不同突变型，黎德伯格夫妇设计了影印培养法。该方法原理与选择培养法一致，但是采用影印法将在完全培养基上单菌落同时接种到不同选择培养基上同时对所有菌落进行选择培养，鉴定效率大大提高。注意：(1)最初的培养基必须是非选择性的，即各种突变型都能在其上生长；(2)必须采用适当的方法如涂布或划线法，使培养物菌落之间分开。2、烈性噬菌体的生活周期：包括吸附、侵入、核酸复制、蛋白合成与装配、释放。吸附：噬菌体以尾丝尖端的蛋白质吸附在菌体表面的特异受体上；侵入：尾丝收缩，尾管中的溶酶菌溶解菌体肠壁，将染色体DNA注入宿主细胞内；核酸复制、蛋白合成：破坏寄主细胞原有的遗传物质，合成大量的噬菌体遗传物质和蛋白质。装配：合成的病毒的各配件装配在一起成为成熟病毒粒子。释放：溶菌酶裂解细菌，释放出数百个噬菌体Hayes(1952)试验证明：接合过程是一种单向转移，A菌株遗传物质到B菌株，从供体“donor”到受体“receptor”。转化主要分为二个步骤进行:(一)供体DNA与受体细胞间的接触与互作肺炎双球菌转化：DNA片断至少有800个碱基对；枯草杆菌的转化：DNA片断至少有16000个碱基对。转化的第一步是使转化DNA与受体细菌间的成功地相互作用，这包括：转化片段的大小、形态、浓度和受体细胞的生理状态。①.转化片断的大小：②.供体DNA分子存在的数目：对特定基因来说，供体DNA分子数目与成功转化有关。链霉素抗性基因转化：在每个细胞含有10个DNA分子之前，抗性转化体数目一直与DNA分子存在数目成正比。原因：在细菌的细胞壁或细胞膜上有固定数量的DNA接受座位，故一般细菌摄取的DNA分子数小于10个。③．受体的生理状态：受体细胞必须在生理上处于感受态。这种感受态只能发生在细菌生长周期的某一时间范围内，在感受态内，活跃合成的蛋白质的细菌细胞壁多少发生改变而易于接受转化DNA。㈡、转化DNA的摄取和整合过程：细菌中的转化，包括供体DNA的结合与穿入，联会和整合。当细菌处于感受态时，外源双链DNA分子可结合在受体细胞表面的接受座位上。细菌在摄取外源DNA时，由DNA移位酶降解其中一条链，并利用降解这条链产生的能量，将另一条链拉进细胞中。???①.结合与穿入：㈡、转化DNA的摄取和整合过程：供体单链DNA片段一旦进入细胞，按各个不同的位点与其相应的受体DNA片段联会。??②.联会：二、接合（conjugation）：1.概念：是指原核生物的遗传物质从供体(donor)转移到受体(receptor)内的过程。特点：需通过细胞的直接接触。实例一：1946年，黎德伯格和塔特姆发现，大肠杆菌细胞之间通过接合可以交换遗传物质。试验如下：不同营养缺陷型的大肠杆菌：A菌株：Met-bio-thr+leu+，B菌株：Met+bio+thr-leu-，2．接合的发现和证实：A+B菌株混合培养，在完全培养基上，几小时后离心，涂布基本培养,长出原养型(Met+bio+thr+leu+)菌落。A菌株和B菌株营养缺陷型，不能在基本培养上生长。1