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汇报人：2024-01-14超分辨光学显微的成像原理及应用进展

目录引言超分辨光学显微成像原理超分辨光学显微技术的应用领域

目录超分辨光学显微技术的最新研究进展超分辨光学显微技术面临的挑战与未来发展结论

01引言

超分辨光学显微技术的发展历程早期光学显微镜受限于光的衍射极限，分辨率难以突破200纳米。近场光学显微镜通过探测样品表面近场光信息，实现超分辨成像，但受限于探测方式和样品特性。远场超分辨光学显微镜基于荧光标记、结构光照明等技术，突破衍射极限，实现远场超分辨成像。

推动相关学科发展超分辨光学显微镜为生物医学、纳米科技等领域提供了有力工具，推动了相关学科的快速发展。探索新的成像技术和方法超分辨光学显微镜的研究不仅是对现有技术的改进和优化，更是对新成像技术和方法的探索和发现。揭示微观世界奥秘超分辨光学显微镜能够观察纳米尺度的结构和动态过程，有助于揭示生命科学、材料科学等领域的微观机制。研究目的和意义

02超分辨光学显微成像原理

传统光学显微镜的分辨率受到光的波长和物镜数值孔径的限制，即阿贝衍射极限，分辨率约为200纳米。两个相邻的点光源在像平面上产生的艾里斑中心间距等于艾里斑半径时，它们刚好能够分辨，此时对应的横向分辨率即为瑞利判据。光学显微镜的分辨率极限瑞利判据阿贝衍射极限

123通过引入具有特定空间频率的结构光照明样品，将高频信息调制到低频区域进行探测，从而突破衍射极限。结构光照明技术利用双光子或多光子激发过程实现局部荧光信号的增强，同时结合受激发射损耗过程减小背景荧光干扰，提高成像分辨率。受激发射损耗技术通过对单个荧光分子的高精度定位和重构，实现超分辨成像。该技术依赖于荧光分子的光开关特性和高精度定位算法。单分子定位技术超分辨光学显微技术突破分辨率极限的原理

结构光照明显微镜（SIM）：采用结构光照明技术，通过改变照明光的空间频率和方向，获取多个低分辨率图像，然后通过计算重构出高分辨率图像。SIM技术具有较高的成像速度和较低的光毒性，适用于活细胞成像。受激发射损耗显微镜（STED）：利用双光子或多光子激发过程实现局部荧光信号的增强，同时结合受激发射损耗过程减小背景荧光干扰。STED技术通过特殊设计的激光束形状和时序控制，实现亚百纳米级别的分辨率。然而，该技术需要较高的激光功率和复杂的系统配置。单分子定位显微镜（SMLM）：通过对单个荧光分子的高精度定位和重构实现超分辨成像。SMLM技术包括光激活定位显微镜（PALM）、随机光学重建显微镜（STORM）等。这些技术利用荧光分子的光开关特性，在不同时间点对单个分子进行定位和记录，然后通过算法将这些位置信息重构为高分辨率图像。SMLM技术具有较高的分辨率和较低的背景噪声，但成像速度较慢且需要特殊的荧光标记策略。010203代表性超分辨光学显微技术及其原理

03超分辨光学显微技术的应用领域

03病原生物学研究超分辨光学显微镜有助于解析病毒、细菌等病原体的超微结构，为疾病诊断和治疗提供新思路。01细胞结构与功能研究超分辨光学显微镜能够揭示细胞内部精细结构，如细胞器、蛋白质复合物等，进而深入解析细胞功能。02神经科学研究该技术可用于观察神经元突触、树突棘等细微结构，揭示神经网络连接和信号传递机制。生物医学领域的应用

纳米材料研究超分辨光学显微镜能够观察纳米材料的形貌、尺寸和分布，揭示其独特性能和潜在应用。表面与界面研究该技术可用于解析材料表面和界面的原子排列、缺陷和反应等，为材料设计和优化提供指导。相变与相分离研究超分辨光学显微镜能够实时观察材料相变和相分离过程，揭示其动力学行为和机理。材料科学领域的应用

超分辨光学显微镜可用于解析岩石、矿物和土壤等样品的微观结构和成分，为地球科学研究提供有力工具。地球科学研究该技术可用于文物表面微观结构的观察和成分分析，为文物保护、修复和鉴定提供依据。文物保护与鉴定超分辨光学显微镜可用于痕迹检验、指纹识别和DNA分析等，提高法医鉴定的准确性和可靠性。法医科学研究其他领域的应用

04超分辨光学显微技术的最新研究进展

结构光照明显微技术（SIM）01利用特定模式的光照明样品，通过计算重构出超越传统光学显微镜分辨率的图像。SIM技术具有较高的成像速度和较低的光毒性，适用于活细胞成像。刺激发射损耗显微技术（STED）02通过引入一个环形损耗光束，降低荧光分子的激发态寿命，从而实现超分辨成像。STED技术可以获得极高的分辨率，但成像速度较慢且光毒性较大。单分子定位显微技术（SMLM）03通过对单个荧光分子的精确定位，重构出超分辨图像。SMLM技术包括光激活定位显微技术（PALM）和随机光学重建显微技术（STORM）等，具有较高的分辨率和适用于固定样品成像。新型超分辨光学显微技术的研发

并行化STED显微技术采用多个损耗光束并行扫描样品，加快STED