酶的工程化与改良.pptxVIP

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酶工程

主讲人:

k.tamilmuhilan,

我是生物技术理学硕士,

阿拉加帕大学。

内容

酶工程

介绍

客观的

涉及的步骤

类型和方法

酶在体内产生化学反应。

它们实际上加快了化学反应的速度来维持生命。

你体内的酶发挥着非常重要的作用。

锻炼肌肉

消除毒素

在消化过程中分解食物颗粒

酶的形状与其功能相关。

高温、疾病或恶劣的化学条件会损害酶并改变其形状。

当这种情况发生时,酶就无法再发挥作用。

酶工程

DNA技术

这些产品可用作化学品、药品、燃料、食品或农业添加剂。

由于酶是蛋白质,因此酶工程是蛋白质工程更大活动的一部分。

酶工程利用r-DNA技术在酶的氨基酸序列中引入所需的变化

酶工程的目标

主要目标是生产一种更适用于工业和其他应用的酶。

可以通过修改酶的各种特性来实现此目的,如下所示:-

改善动力学性质。

消除变构调节。

增强底物和反应特异性。

提高热稳定性。

最佳pH值的改变。

适合在有机溶剂中使用。

增加/减少最佳温度。

酶工程涉及的步骤

涉及的步骤:

方法:

酶工程有两种通用策略:

合理设计

定向进化

合理设计

这是酶工程的早期方法,至今仍被广泛使用。

在合理设计中,科学家利用蛋白质结构和功能的详细知识来做出所需的改变。

总的来说,它的优点是成本低廉、技术简单。

然而,主要的缺点是通常无法获得酶的详细结构知识。

即使可用,预测各种突变的影响也可能非常困难,因为结构信息通常提供酶结构的静态图像。

合理设计的两种方法

重叠延伸

全质粒单轮PCR

定向进化:

也被称为

体外进化

定向分子进化

加速进化

定向进化(DE)包含几种分子技术,通过结合随机诱变或重组技术,在体外模拟达尔文进化的过程。

它不使用酶的结构数据,除了其功能特性和其相应的DNA序列之外。

DE有时被称为非理性或半理性设计。

定向进化

模仿重组:DNA改组

使用限制性酶:

1.Digest相关基因家族

2.DNA连接酶连接片段

3.嵌合基因

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