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实验六
x-染色质的制片与观察
一、实验目的
1）通过实验了解形成X-染色质的原理,及其
在临床诊断上的应用
2）掌握人类X-染色质的制片,能在显微镜
下正确识别Barr氏小体
二.实验原理
早在1949年Barr等人发现雌猫的神经细胞
间期核中有一个染色很深的染色质小体，
而雄猫没有后来在大部分正常女性表皮
口腔颊膜，羊水等许多组织的间期核中也
找到一个特征性的、浓缩的染色质小体，
男性则无
由于这种染色质小体与性别及X染色体数目
有关，所以称为巴氏小体或性染色质体
在果蝇和哺乳动物中，X染色体上的基因在纯
合的雌性细胞中有相同的两份，雄性中只有
一份可是雌雄在表型上却看不出任何显著
的差别，这种现象的遗传机制是由于存在一
种剂量补偿效应
剂量补偿效应：是指在XY性别决定机制的生
物中，使性连锁基因在雌雄性别中有相等或
近乎相等的有效剂量的遗传效应
M.F.Lyon提出了阐明哺乳动物剂量补偿效应和
形成Barrbody的X染色体失活的假说（Lyon
hypothesis）其主要内容是：
1、正常雌性哺乳动物的体细胞中，两条X染色
体中只有一条X染色体在遗传上有活性,另一条
在遗传上无活性其结果使X连锁基因得到剂
量补偿，保证染色体为XX的雌性和XY的雄性具
有相同的有效基因产物
2、X染色体失活是随机的
在同一哺乳动物的体细胞中，有些细
胞里父源的X染色体失活；另一些细胞里，
母源的X染色体失活
3、失活发生在胚胎发育早期
例如人类，在胚胎发育第16天时（合
子细胞增殖到5--6千个细胞时）发生失
活某一个细胞的一条X染色体一旦失活，
这个细胞的所有后代细胞中的该X染色体
均处于失活状态
此外，细胞学的研究发现Barr小体的数目正
好是X染色体数目减1
设X染色体数为n，则巴氏小体数目＝n-1，
XXX的个体则具2个巴氏小体
因而可以根据X染色质的有无和数目来鉴定胎
儿性别及性别畸形
因为失活的X染色体已经异染色质化,成为
因为失活的X染色体已经异染色质化,成为
功能性异染色质。失活的X染色体的固缩周期
功能性异染色质。失活的X染色体的固缩周期
与其它染色体是不同步的，且它是在S期末开始
与其它染色体是不同步的，且它是在S期末开始
复制的，是一种浓缩的、惰性的异染色质化的
复制的，是一种浓缩的、惰性的异染色质化的
小体
小体
三.实验材料与器材、试剂
实验材料:人体口腔粘膜或毛发
根部细胞
实验试剂:50%冰醋酸、改良碱
性品红染色液或醋酸地衣红染
色液
实验器材用具:显微镜、牙签、
盖片、玻片、镊子、滤纸、
为什么要漱口
四.实验步骤为什么要漱口
？
？
1.口腔颊部粘膜细胞巴氏小体观察：
取材：漱口2－3次，用牙签钝面刮取颊部
粘膜上皮细胞
涂片:将牙签上的细胞平铺涂在载片上，
晾干1－2分钟
为什么染色时
为什么染色时
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