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上海市肺科医院检验科文件编号：
FKJYK-ZD-WS-XU-040
分枝杆菌菌种鉴定方法页码：第19页，共1页
作业指导书版本：2012/0
生效日期：2012-01-04
1.分枝杆菌菌种初步鉴定：
1.1试剂：见培养基配制标准程序
1.2接种方法:与药物敏感试验相同，
-2
10mg／ml菌液，接种0.1ml。37℃孵育，每周观一次，快速生长非结核分枝
杆菌一周内可生长菌落，缓慢生长分枝杆菌，四周报告结果。与药物敏感性试验同
步进行。
1.3结果与报告
分枝杆菌菌种初步鉴定结果见表
PNBTCH
牛分枝杆菌--
结核分枝杆菌-+
非结核分枝杆菌++
参考文献:结核病诊断细菌学检验规程
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上海市肺科医院检验科文件编号：
FKJYK-ZD-WS-XU-040
分枝杆菌菌种鉴定方法页码：第20页，共1页
作业指导书版本：2012/0
生效日期：2012-01-04
2.分枝杆菌菌种系统鉴定：
临床分离分枝杆菌菌株，经PNB、TCH等鉴别培养基初步鉴定后，确定为非结
核分枝杆菌者或药物敏感试验耐PAS的分离菌株，以及临床提出需作菌种鉴定的菌
株，可按下列方法进行系统鉴定。
2.1培养特性
2.1.1生长速度
-2
接种原始分离株的次级培养物10mg／ml菌液0.1ml于改良罗氏培养基上，分
别置于37℃;45℃和28℃孵育，一周之内生长菌落者为快速生长分枝杆菌。一周后
生长者为缓慢生长分枝杆菌。
2.1.2色素产生
将分离菌株接种两支改良罗氏培养基，一支用锡纸或黑纸包缠密封，另一支
不包纸，二者一起放入37℃孵育，待不包纸管长出菌落时，开启包纸管观察，有
色素产生为暗产色菌。无色素者，开启试管胶塞通气，以100瓦钨灯泡在相距
450cm处照射2—3h，继续放37℃孵育3天，每天观察一次，产生色素者则为光产
色菌。不论照光与否，菌落均无色素产生者为不产色菌。
2.2生化试验
2.2.2耐热触酶试验
（1）原理：有些分枝杆菌经68℃处理后，产生的过氧化氢酶仍保持活性，可
分解过氧化氢。
（2）试剂：
a)pH7.01／15M磷酸盐缓冲液(PB)
b)30％过氧化氢溶液(H0)
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c)10％吐温一80溶液121℃10min灭菌，4℃保存。
(3)方法：取生长在改良罗氏培养基3—4周的菌落磨菌比浊制备10mg／ml
菌悬液，取0.5ml混悬于含试剂(1)1.0ml试管内，放入68℃水浴20min，待冷却
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上海市肺科医院检验科
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