(32)--细胞骨架-微丝结构与组装.ppt

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微丝的结构与组装StructureandAssemblyofMicrofilament

细胞骨架概述细胞骨架类型侠义细胞质骨架cytoskeleton广义细胞骨架Cellskeleton微丝(microfilament,MF);微管(microtubules,MT);中间纤维(intermediatefilament,IF)细胞核骨架nuclearskeleton细胞膜骨架nuclearskeleton细胞外骨架exocytoskeleton

讲课大纲123功能形态结构动态组装思考:What?How?

微绒毛细胞质中的张力纤维细胞迁移中前缘的片状丝状伪足细胞分裂时的胞质收缩环微丝骨架微丝(microfilament,MF),肌动蛋白纤丝(actinfilament,F-actin)是指真核细胞中由肌动蛋白(actin)组成、直径为7nm的骨架纤维。微丝在细胞中通常成束存在

F-肌动蛋白呈双股螺旋状扭链,绳状1微丝的形态结构1.1F-actin:肌动蛋白丝有极性直径为7nm螺距36nmG-actinF-actin

.碟状内部ATP和Mg2+结合位点1微丝的形态结构6种G-actin?-actin?-actin4?-actin横纹肌心肌血管平滑肌肠道平滑肌非肌细胞进化中高度保守,同源性极高?1.2G-actin:肌动蛋白单体,微丝基本结构组分G-actinF-actin

思维拓展:思考:Actin进化中高度保守,同源性极高理论联系实际,有何应用?编码基因属于管家基因(house-keepinggenes),所有细胞中均表达的一类基因,其产物是维持细胞生命活动所必需的。如微管蛋白基因TUBULIN、肌动蛋白基因ACTIN等。.作内参.知识点联系:

●成核(nucleation)需要Arp2/3●延伸(elongation)●稳定状态(steadystate)2微丝的组装2.1装配过程(invitro)Arp2/3参与MF组装:促进成核;形成侧枝

肌动蛋白亚基都是从同一个方向加到多聚体上;结合ATP的一端为正端(+),另外一端为负端(-)(+)端生长快,(-)端生长慢2.2微丝组装的动态性质2微丝的组装微丝的极性-头尾相接

2.2微丝的动态性质2微丝的组装组装Or去组装?影响三因素聚合与水解的速度有否ATPCap结合ATP的G-actin浓度◆当组装水解,在微丝末端结合有ATPCap,微丝稳定延伸。反之末端无ATPCap,微丝缩短。游离G-actin和F-actin之间的平衡取决于携带ATP的G-actin的浓度,处于临界浓度,达稳定期◆微丝组装和去组装的动态平衡

踏车行为Tread-milling(invitro)微丝的正极由于actin亚基不断添加而延长,而负极由于actin亚基去组装而缩短的现象。2微丝的组装2.2微丝的动态性质

1.3影响微丝组装的特异性药物影响微丝组装的特异性药物2.3影响微丝组装的特异性药物2微丝的组装Rhodamin标记鬼笔环肽染色下的swiss3T3成纤维细胞(显示微丝分布)◆细胞松弛素B(cytochalasinsB)-破坏作用结合F-actin切断微丝,并结合在微丝末端,抑制G-actin聚合。结合F-actin,不结合G-actin,so稳定F-actin抑制解聚。◆鬼笔环肽(phalloidin)–稳定作用

实验分析实验一:用细胞松弛素B在0.5—1.0微克/毫升浓度下作用24小时,会使鼠的培养纤维芽细胞只进行核分裂,而细胞质的分裂受到抑制,从而成为多核细胞。Why?实验二:用细胞松弛素和鬼笔环肽分别处理细胞,细胞运动都被阻止了。

小结12形态结构动态组装G-actinF-actin

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