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微生物检验规范

1.目的

明确微生物检验方法和监控标准，规范微生物检验的各项操作，通过对原

料、产品及生产线各要求环节进行微生物测试，从检测结果来判定原料、产品及

生产线微检监控点的微生物情况是否符合公司和国家规定的标准，确保产品品

质。

2.适用范围

公司所有需要作微生物检验的原料、每批产品及微检监控点。

3.职责

3.1品保微生物检验员负责微生物检验实验器材和无菌室的准备工作。

3.2品保微生物检验员负责原料和生产线微检监控点的微检样品抽样、保存、

登记和微生物检测工作。

3.3成品制程人员负责成品微检样品的抽样工作，品保微生物检验员负责成

品微检样品的保存、登记和微生物检测工作。

3.4品保微生物检验员负责出具检测报告并作出符合性判定。

3.5品保科长负责微生物检测报告的审核。

4.作业程序

4.1实验器材

4.1.1实验器材、培养基和试剂

1．超净工作台．恒温培养箱236±1℃

3．低温培养箱25-28℃．4恒温水浴锅46±1℃

5．电子/托盘天平（精确到0.1g）．6高压蒸汽杀菌锅

7．烘箱．酒精灯8

9．记号笔．打火机10

11．镊子．药匙12

13.生物滤膜．培养皿149cm/6cm

15.锥形瓶300ml/500ml+硅橡胶塞16．试管

17．小发酵管．试管架18

19．接种环．显微镜20

21．塑料篮子．移液管221ml、5ml、10ml

23.膜过滤设备医用不锈钢剪刀24.

4.1.2培养基和试剂

1．总菌数培养基平板计数琼脂培养基

2．大肠菌群培养基结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）、煌绿乳糖胆盐

（BGLB）

3.霉菌、酵母菌培养基虎红培养基

4．氯化钠

6．乙醇

7．二氧化氯粉剂

8.过氧乙酸

4.2微生物检验的前准备

4.2.1检验所需器具的灭菌

4.2.1.1培养皿及移液管的干热灭菌

洁净干燥的培养皿，倒放于专用培养皿铁筒内，洁净干燥的移液管，尖端

朝下，置于移液管专用的铁筒内，把铁筒放在烘箱中，于120℃干热灭菌

120分钟后，调至160-180℃干热灭菌120分钟后，关掉烘箱，自然冷却至

60℃以下，方可打开烘箱门取出置无菌室冷却备用。

4.2.1.2锥形瓶及移液管的湿热灭菌

洁净的锥形瓶，塞上硅橡胶塞并用牛皮纸包扎好瓶口，洁净的移液管，用

牛皮纸包扎完善后，置于蒸汽灭菌锅中，于121℃湿热灭菌20分钟即可。

4.2.1.3镊子、接种环等的火焰灭菌

接种环、镊子要在酒精灯上须灼烧过方可使用；稀释操作时试管口应在火

焰上方；培养基容器口边在火焰上方。

-6

4.2.1.4化学灭菌（75%酒精、100×10ClO）

2

无菌超净台，手部及不能加热灭菌的PE或塑胶制品，桌子等需用化学灭

-6ClO擦洗灭菌。

菌法；操作台、桌子、凳子、地面在使用完后均用100×10

2

4.2.2培养基及其缓冲稀释液的配制和湿热灭菌

4.2.2