《微生物学检验》课件——第十五章 厌氧菌.pptVIP

第十五章厌氧菌

概述梭状芽胞杆菌属厌氧球菌无芽胞厌氧杆菌目录

学习目标1厌氧菌的检验标本采集与送检方法、检验程序及微生物学检验方法。2梭状芽胞杆菌属生物学特性、临床意义及微生物学检验。3无芽胞厌氧菌在正常人体的分布及临床意义

PART01概述

厌氧菌概念:厌氧菌（anaerobicbacteria）是一类只能在低氧分压或无氧条件下生长的细菌。特点:种类多分布广感染可发生于人体各个部位

厌氧菌厌氧菌厌氧芽胞梭菌无芽胞厌氧菌：一般是人体正常菌群，致病力弱

厌氧菌特点特点芽胞厌氧菌无芽孢厌氧菌种类1个菌属40多属分布自然界人和动物体内致病外源性感染多以外毒素致病内源性感染多为条件致病菌

标本采集与送检采集部位恰当正确采集避免污染严格厌氧及时送检针筒运送法无氧小瓶运送法标本充盈运送法组织块运送法厌氧袋运送法棉拭运送法运送

标本采集与送检

标本观察和涂片镜检肉眼观察：观察标本的性状（脓性、带血、气味、硫磺样颗粒、坏死组织等）涂片染色镜检：估计细菌数量、观察细菌形态、染色性，以便选择培养基和培养方法

分离培养初代培养：厌氧培养48h次代培养：挑取挑4-6个不同菌落耐氧试验需氧培养厌氧培养挑取不生长的菌落生长的菌落鉴定接种2个平板

常用培养基非选择性培养基心脑浸液＋％5脱纤维羊血＋氯化血红素＋维生素K选择培养基七叶苷胆汁平板——培养脆弱类杆菌卵黄平板和兔血平板——培养产气荚膜梭菌CCFA培养基——培养艰难梭菌卡那万古冻溶血琼脂平板——培养类杆菌属、普雷沃菌属和卟啉单胞菌属

厌氧培养法1厌氧罐培养法2厌氧器袋法3厌氧手套箱法

鉴定1形态与染色：可通过革兰染色观察厌氧菌的染色性、形态及某些特殊结构，但由于培养基种类及培养时间不同，某些菌种的染色结果易由革兰阳性变为阴性，此时可用拉丝试验（用于判断厌氧性革兰阳性菌和革兰阴性菌，方法是加30g/L氢氧化钾1滴于载玻片上，取一接种环的细菌与之混合，经1min后用接种环轻轻挑起，能拉起丝状者为革兰阴性菌，不能拉起丝状者为革兰阳性菌。）协助判断。

鉴定2菌落性状：根据细菌基本性状及是否产生色素或荧光、是否溶血等特点可帮助细菌的鉴定3快速鉴定：常采用厌氧菌快速发酵试验，其原理是根据细菌在代谢过程中产生的胞外酶试验及少量的生化基质迅速反应，能在4h观察结果，不需要在厌氧环境下培养，只需浓菌液即可。目前国外有专供厌氧菌鉴定的快速鉴定系统，如自动微生物鉴定系统VITEK-ANI、MicroScan-ANI等。

鉴定厌氧菌的鉴定可通过以下方法气液相色谱技术PCR基因探针等这些方法具有特异性强、敏感性高及快速简便等优点。

PART02梭状芽胞杆菌属

梭状芽胞杆菌属梭状芽胞杆菌属破伤风梭菌肉毒梭菌产气荚膜梭菌艰难梭菌破伤风肉毒中毒气性坏疽抗生素相关性腹泻和假膜性结肠炎能形成芽胞、G+粗大杆菌大多生存于土壤，有些寄生在人或动物肠道内

梭状芽胞杆菌属梭菌属的形态（Clostridium:morphology）特性Characteri-tics破伤风梭菌C.tetanic肉毒梭菌C.botulinum产气荚膜梭菌C.Perfringens孢子（Spore）圆形，顶端椭圆形，近极端椭圆形，近极端很少见菌细胞形状细菌呈鼓槌状网球拍状矩形，大杆菌鞭毛（Flagella）++-荚膜（Capsule）--+

梭状芽胞杆菌属C.botulinumC.tetani芽胞增强抵抗力！！！

梭状芽胞杆菌属生物学性状临床意义微生物学检查方法防治原则破伤风梭菌（Clostridiumtetani）

一、生物学性状形态:菌体细长，周鞭毛，无荚膜，鼓槌状，有芽胞芽孢位于菌体顶端，圆形大于菌体，呈“火柴棒状”。培养特性:培养用庖肉培养基，37℃48h形成不规则菌落。在血平板上培养24～48h后，可形成中心紧密，四周松散似羽毛状的不规则菌落，菌落周边有轻度β溶血环。

一、生物学性状破伤风芽胞

一、生物学性状破伤风梭菌

一、生物学性状破伤风芽胞梭菌破伤风杆菌在庖肉培养基上生长(混浊、变黑)右侧试管未接种

一、生物学性状生化反应：在庖肉培养基中生长，肉汤均匀浑浊，可分解蛋白质产生甲基硫醇、H2S、NH3等，有腐败性臭味。不发酵糖类；能液化明胶产生H2S，形成吲哚；不能还原硝酸盐。抵抗力：繁殖体对外界理化因素的抵抗力与一般细菌相似，但芽胞抵抗力很强。对青霉素敏感。

一、生物学性状致病物质破伤风痉挛毒素(tet