分子简答题分析和总结.docx

2011-2012真题的简答题。

1.生物体内哪些机制保证了DNA复制的保真性.

答：DNA聚合酶的校对作用；RNA引物起始复制可减少复制错误；修复系统有多种机制

(光修复、切除修复、错配修复、易错修复、SOS修复)和酶。

答：①使用oligoDT，对这个RNA做反转录，如果获得相应的cDNA，那这个序列就是真核mRNA,（或使用oligoDT的柱子检测是否是真核mRNA。如果能被柱子吸附上，就是真核mRNA。）因为真核mRNA的末端的具polyA尾巴可以和oligoDT互补。否则可能是

答：①使用oligoDT，对这个RNA做反转录，如果获得相应的cDNA，那这个序列就是真核mRNA,（或使用oligoDT的柱子检测是否是真核mRNA。如果能被柱子吸附上，就是真核mRNA。）因为真核mRNA的末端的具polyA尾巴可以和oligoDT互补。否则可能是tRNA，rRNA或原核mRNA。②在被侧序列的5和3端分别加上特异的寡聚接头并用RNA酶连接，以5端特异寡聚接头设计的引物及3端特异接头序列扩增被测序列。测序并进行序

列比对分析鉴定其是否有SD序列，如果具有SD序列则为原核mRNA.

真核生物组蛋白修饰有哪些？以目前的研究成果，在活跃转录的基因启动子区哪种组蛋白修饰最常见？

答：真核生物组蛋白修饰有：磷酸化、甲基化、乙酰化、ADP核糖基化。H3、H4修饰作用较普遍，H2B有乙酰化作用、H1有磷酸化作用。

催化蛋白乙酰化反应的是组蛋白乙酰化转移酶（HAT）。HAT主要由2类：一类与转录有关，另一类与核小体组装以及染色质的结构有关。许多转录激活因子都有HTA活性。TAFⅡ250组蛋白乙酰基转移酶是TAFⅡD复合酶的一个亚基，它的一个主要功能是与启动子结合协助起始转录，能使组蛋白H3和H4乙酰化。组蛋白乙酰基转移酶是转录共激活子，通过与增强子结合蛋白相互作用来调节转录，能使组蛋白乙酰化。乙酰化中和了组蛋白尾巴的正电荷，降低了它与DNA的亲和性，导致核小体构象发生有利于转录调节蛋白与染色质相结合的变化，从而提高了基因转录的活性。

说明真核生物表达调控的不同层次。并请说明最重要的调控环节

答：（1）DNA和染色体水平的调控。包括：基因重排、基因扩增、DNA修饰、基因封闭、核小体的修饰（染色体结构）。

（2）录水平的调控：包括转录起始、延伸的弱化、终止都会对mRNA前体水平产生影响，是重要的调控水平。

转录后RNA前体加工及转运的调控.真核生物转录和翻译不偶联,转录出的mRNA前提经加工才能成熟为翻译模板mRNA，此过程包括剪切、修饰、编辑、5’和3’端的修饰及转运到翻译场所等。

翻译水平的调控：包括核糖体的磷酸化/去磷酸化调节，poly(A)的调节，移码和通读等等。(5)翻译后水平调控：包括翻译产物的剪切、修饰（如糖基化、磷酸化、切除信号肽、脂化及构象形成、转运和装配形成复合蛋白体）

(6)mRNA降解的调控，随生长发育和外界环境改变、细胞中蛋白质种类也在不断变化，原有mRNA要降解并以新mRNA代之，因此mRNA是有一定寿命的、细胞中有控制mRNA寿命的机制。

转录水平的调控是重要的调控水平,真核生物在转录水平上的调节主要是通过反式作用因子、顺式作用元件和RNA聚合酶的相互作用来完成的。当反式作用因子和顺式元件结合后，将影响转录起始复合物的形成，从而影响转录的起始和效率。

a、启动子和增强子的顺式作用元件

真核细胞基因的启动子由一些分散的保守序列组成，其中包括TATA框、CAAT框和多个GC框等，后两个均属于上游控制元件，由增强子、沉默子及其应答元件进一步调节转录活性。增强子能促进转录，他由比较集中的保守序列组成，增强子具有组织特异性，他优先或只能在某种类型的细胞中表现功能，增强子常存在与DNA酶的超敏感部位。增强子与启动子之间距离对活性并无影响，因为DNA可以弯曲，结合在增强子的反式激活因子能与转录复合物相作用，位于增强子的应答元件可调节增强子的活性。

b、调节转录的反式作用因子

调解和控制转录活性的蛋白质有三类：基本转录因子、上游因子和可诱导因子。基本转录因子结合在TATA框和转录起点，与RNA聚合酶一起形成转录起始复合物；上游因子结合在启动子和增强子的上游控制位点；可诱导因子与应答元件相互作用。所有结合DNA的反式作用因子都有结合DNA的结构域，并由一些共同的结构结合DNA的基序结构主要有：螺旋-转角-螺旋，锌指结构，亮氨酸拉链，螺旋-环-螺旋等。

分别说出7中以上RNA的功能

答：（1）RNA