Roche LightCycler 480 中文操作说明书.docx

LightCycler 480中文操作说明

罗氏医学仪器公司/应用科学部门

February 2008

目录

一.

启动机器与软件

3

二.

软件设定---开启新实验

5

三.

样品编辑

9

四.

结果分析

12

五.

报告

18

六.

入)

数据转移至其它计算机(数据输出与输

19

七.

使用者管理

19

一．启动机器与软件

启动机器

机器主开关位于机器右后方。

机器正面两个警示灯代表机器状态。待警示灯(右)由闪烁橘色灯转变成稳定橘色灯，警示灯(左)由橘色转变成绿色(约三分半钟)，表示机器已经启动完成。

左警示灯

左警示灯

右警示灯

机器状态

橘

*闪烁*

橘*闪烁*

正在初始化

绿

橘

机器启动完成

96/384孔盘还未放入

绿

橘*闪烁*

96/384孔盘正在放入中

绿

绿

机器启动完成

96/384孔盘已经放入

绿

绿*闪烁*

绿*闪烁*

实验进行中

按压机器正面上唯一的按钮，放入已经封膜完成之96或384孔盘。放置完成后，左右两警示灯都呈现绿色。

启动软件

开启计算机，并以正确的使用者名称与密码登入Windows。Username:OPERATOR

Password:LC480

开启LightCycler480软件，并输入正确的使用者与密码。

二．软件设定--开启新实验

设定新实验

软件开启后，会进入主画面。点选“NewExperiment”。

出现实验设定窗口。任何时候需要回主画面的话，点选画面右边的按钮。

设定实验

若要套用设定好的实验步骤(Template)，请跳至6.。

若要套用设定好的实验步骤(Template)，请跳至6.。

在实验设定画面上方，先选择适当的DetectionFormat。选项包含:

另外可再点选“Customize”勾选所需的滤片组合。

输入反应体积:96wellplate围为10-100ul，而384wellplate围为5-20ul。

设定实验步骤(Program)

设定program，包含有Pre-incubation,Amplification(PCR),Meltingcurve(optional)与Cooling。利用『+』与『－』增加或删除步骤。

设定循环数目(Cycle)与分析模式。通常Amplification(PCR)program设定成『Quantification』，而MeltingCurveprogram设定成『MeltingCurve』。

设定详细温度变化(依照不同实验方法与设计而有所不同)

点选各个program即可设定详细温度变化步骤，请根据产品说明书来设定，利用『+』与『－』增加或删除步骤。需要设定的参数包含Target(℃)目标温度，AcquisitionMode(荧光侦测模式)，Hold(hh:mm:ss)停留时间。RampRate(℃/s)为升降温速度，围如下：

RampRate(℃/s) Heatingup Coolingdown

96-well

Block

1.0

–4.4

/s

℃

1.0

–2.2℃

/s

384-well

Block

1.0

–4.8

/s

℃

1.0

–2.5℃

/s

若设定温度低于

若设定温度低于

50℃，请把 RampRate 调整成 1.5℃/s(96

well)或2.0℃/s(384well)。

将实验步骤储存成『Template』以便下次进行套用。点选左下角“SaveAsTemplate”即可把此步骤储存起来。

若要进行套用时，请直接点选窗口左下角“ApplyTemplate”，选择欲套用之实验步骤即可。

设定完成后点选“StartRun” 开始进行实验。

跳出档案储存窗口，请输入欲储存之文件名称。

实验进行中会进入另一个Data

实验进行中会进入另一个Data窗口，窗口下方按键功能如下：

EndProgram:结束此Program,进入下一个Program。

? +10Cycles:实时增加循环数目。

AbortRun:马上结束此实验，请注意，若按此键，则此次实验的

结果将不储存。

三．样品编辑

将样品分群

点选窗口左边的 “SubsetEditor”。

点选“New”新增新的群组，并将其命名。

利用鼠标选取此群组之样品位置，点选窗口右下角“Apply”，此时被选取的样品位置会呈现实心的蓝色，如下图。

以此方式依序将所有样品群组编辑完毕。

样品必须分群才能够独立分析，但是样品是否分群并不影响样品的Cp值。

编辑样品