HPLC及HPLCMS析方法的开发及其在药物析中的应用.pptx

HPLC及HPLC/MS分析方法开发及其在药品分析中应用HPLC及HPLCMS析方法的开发及其在药物析中的应用第1页

2基于分离分析科学技术小颗粒填料色谱柱以光谱、质谱技术作为检测伎俩专属性、分离效率及灵敏度适合用于广泛色谱应用适合用于开发新方法适合用于现有方法改进HPLC及HPLC/MS法HPLC及HPLCMS析方法的开发及其在药物析中的应用第2页

3质量源于设计（QualitybyDesign，QbD）准则试验设计方法学（DesignofExperiment，DoE）方法验证（MethodValidation）：确保方法在样品分析一定范围内中准确、重现、可靠、耐用性。分析方法学开发及验证HPLC及HPLCMS析方法的开发及其在药物析中的应用第3页

4方法开发试验室取得方法及利用过程方法验证方法确认方法转移准确度，精密度，专属性，检测限，定量限，线性，范围，耐用性分析条件筛选（色谱柱,流动相,pH等）及优化（梯度、柱温、流速等）法定检验方法在使用环境中适用性评定（人员、仪器、样品、试剂）非法定检验方法在试验室之间传递文件化过程HPLC及HPLCMS析方法的开发及其在药物析中的应用第4页

5试验室取得方法及利用过程方法验证方法确认-用一个性质明确物质来挑战建立分析方法用一个确定方法来挑战现实分析环境专属性，准确度，精密度，LOD，LOQ普通不需要进行线性，范围，耐用性试验HPLC及HPLCMS析方法的开发及其在药物析中的应用第5页

6ICH、USP1225、ChPIIAppendixXIXA方法验证内容准确度（Accuracy）精密度（Precision）-重复性，重现性，中检精密度专属性（Specificity）检测限（LOD）定量限（LOQ）线性（Linearity）范围（Range）耐用性（Robustness）HPLC及HPLCMS析方法的开发及其在药物析中的应用第6页

7方法验证-系统适用性系统适用性试验内容在分析未知样品之前或期间，检验系统以确保系统之性能到达要求要求塔板数，拖尾因子，分离度确定重现性（%RSD）系统适用性“样品”主组份与预期副产物之混合物系统适用性试验是色谱方法一部分HPLC及HPLCMS析方法的开发及其在药物析中的应用第7页

8方法验证-系统适用性容量因子k2精密度/进样重复性RSD?1%,n?5分离度Rs?2(主峰与最近洗脱色谱峰之间)拖尾因子T?2理论塔板数通常NHPLC及HPLCMS析方法的开发及其在药物析中的应用第8页

9方法验证-USP1225类型1主组份或活性成份定量分析方法类型2杂质或降解化合物测定方法类型3性能特点之确定分析方法如溶出度试验类型4判别试验HPLC及HPLCMS析方法的开发及其在药物析中的应用第9页

10方法验证-USP1225验证内容类型1定量程度试验类型3类型4判别试验准确度++**-精密度++-+-专属性+++*+检测限--+*-定量限-+-*-线性++-*-范围++**-类型2*可能需要，详细与特定试验性质相关。HPLC及HPLCMS析方法的开发及其在药物析中的应用第10页

11怎样进行方法验证分析试验阶段按照要求试验计划或步骤通常需要3到5天在不一样操作条件下，进不一样浓度试样原料及制剂皆需分析数据分析阶段对分析结果进行统计学计算色谱结果是相正确用统计学分析方法，能够客观地评定最终止果真实改变HPLC及HPLCMS析方法的开发及其在药物析中的应用第11页

12方法验证步骤线性Day1-3定量限检测限试验参数2MinMax耐用性试验参数3MinMax试验参数4MinMax六次空白样品基线噪音定量限精密度定量限原料药浓度4原料药浓度3原料药浓度2原料药浓度1原料药浓度5原料药精密度1-3天六次重复,100%原料药试验参数1MinMax浓度4:120%原料及制剂浓度3:100%原料及制剂浓度2:80%原料及制剂浓度1:60%原料及制剂浓度5:140%原料及制剂HPLC及HPLCMS析方法的开发及其在药物析中的应用第12页

13每一方法验证过程由80到100次分析组成每次分析中，仅一个组分（一个色谱峰）即可产生7个相关结果（峰面积，保留时间，分离度等……）每一组分最终得到总共约700个数字全部这些数字需要进行数学处理：手工处理（计算器，ExcelMacro’s等）专用方法验证程序方法验证复杂性HPLC及HPLCMS析方法的开发及其在药物析中的应用第13页

14液相色谱方法开发HPLC及HPLCMS析方法的开发及其在药物析中的应用第14页

15液相色谱方法开发依据分析物化学性质选配色谱条件基于既往经验及思索进行合理猜测通常辅以资料参考问询同事“步进式