化妆品中邻苯二甲酸酯类物质的检测方法.docx

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附件5：

化妆品中邻苯二甲酸酯类化合物的检测方法

范围

本方法规定了测定香水、发胶、指甲油等化妆品中10种邻苯二甲酸酯类化合物的高效液相色谱法。

本方法适用于香水、发胶、指甲油等化妆品中10种邻苯二甲酸酯类化合物的含量测定。

本方法所指的10种邻苯二甲酸酯类化合物包括邻苯二甲酸二甲酯（DMP）、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二正丙酯（DPP）、邻苯二甲酸二正丁酯（DBP）、邻苯二甲酸二正戊酯（DAP）、邻苯二甲酸二正己酯（DHP）、邻苯二甲酸丁基苄酯

（BBP）、邻苯二甲酸二环己酯（DCHP）、邻苯二甲酸二正辛酯（DOP）和邻苯二甲酸二异辛酯（DEHP）。

本方法中各种邻苯二甲酸酯类化合物的检出限及取1g样品时的检出浓度见表1。

表1 各种邻苯二甲酸酯类化合物的检出限和检出浓度

物质名称

DMP

DEP

DPP

BBP

DBP

DAP

DCHP

DHP

DEHP

DOP

检出限/ng

0.5

0.5

3

3

3

40

40

40

5

5

定量下限/ng

2

2

10

10

10

135

135

135

20

20

检出浓度/（?g/g）

1

1

5

5

5

70

70

70

10

10

最低定量浓度/（?g/g）

4

4

20

20

20

270

270

270

40

40

原理

邻苯二甲酸酯类化合物在280nm处有特征紫外吸收，可用反相高效液相色谱

（HPLC）分离，并根据保留时间和紫外光谱图定性，峰面积定量。

试剂

甲醇，色谱纯。（溶剂应不含邻苯二甲酸酯类化合物）

邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二正丙酯、邻苯二甲酸丁基苄酯、邻苯二甲酸二正丁酯、邻苯二甲酸二正戊酯、邻苯二甲酸二环己酯、邻苯二甲酸二正己酯、邻苯二甲酸二异辛酯、邻苯二甲酸二正辛酯（纯度97.5%）。

混合标准储备溶液（?＝1000mg/L）：分别称取10种邻苯二甲酸酯类化合物标

准品0.05g（精确到0.1mg），用甲醇（3.1）溶解，移入50mL容量瓶中，定容，摇匀，配成质量浓度为1000mg/L的混合标准溶液。

仪器

高效液相色谱仪，具有二极管阵列检测器，配色谱工作站。

微量进样器或自动进样装置。

超声波清洗器。

高速离心机。

电子天平。

分析步骤

样品预处理

称取样品约1g（精确至1mg）于10mL具塞刻度管中，加入甲醇（3.1）至刻度，振摇，超声提取20min，必要时可高速离心。经0.45?m滤膜过滤，滤液作为待测样液备用。

测定

色谱参考条件

5.2.1.1 色谱柱：C18柱，250mm×4.6mm，5?m。

流动相：A相：甲醇，B相：水，梯度洗脱，洗脱程序见表2。

流速：1.0mL/min。

检测器：二极管阵列检测器，检测波长为280nm。

柱温：25℃或室温（无温控装置时适用）。

表2 流动相甲醇和水梯度洗脱程序（体积比）

时间/min

0

12

15

22

23

25

甲醇+水

75+25

75+25

100+0

100+0

75+25

75+25

校准曲线的制备

移取邻苯二甲酸酯类化合物标准储备溶液（3.3）0mL、1.00mL、2.00mL、4.00mL、6.00mL、8.00mL于10mL具塞刻度管中，用甲醇（3.1）稀释至刻度，摇匀。此时溶液中各组分浓度分别为0mg/L、100mg/L、200mg/L、400mg/L、600mg/L和800mg/L。在设定色谱条件下，分别取5?L进行HPLC分析。根据标准系列质量浓度和峰面积，绘制校准曲线。

样品测定

在设定色谱条件下，进5?L待测样液进行高效液相色谱分析。若样品中待测组分含量过高，应用甲醇稀释后测定。色谱图检出的物质，经与该物质的标准紫外光谱图比较确证后，根据峰面积，从校准曲线上查得相应组分的质量浓度。

空白试验

除不称取样品外，按以上步骤进行。

平行试验

按以上步骤，做两份样品的平行测定。

结果计算

??V

?（邻苯二甲酸酯）=——————

m

式中：?（邻苯二甲酸酯）——化妆品中邻苯二甲酸酯的质量分数，?g/g；

?——从校准曲线上查得的待测样液中邻苯二甲酸酯的质量浓度，mg/L；

V——样品定容体积，mL；

m——样品用量，g。

色谱图

图1 10种邻苯二甲酸酯类化合物混合标准溶液（800mg/L）色谱图

1：DMP（3.313min）；2：DEP（4.471min）；3：DPP（7.446min）；4：BBP（14.019min）；5：DBP（14.894min）；6：DAP（18.125min）；7：DCHP（18.310min）；8：DHP（18.979min）；9：D