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白茅根中的活性成分分离鉴定
TOC\o1-3\h\z\u
第一部分白茅根提取物总酚含量测定 2
第二部分白茅根提取物总黄酮含量测定 4
第三部分白茅根提取物活性成分HPLC分析 6
第四部分白茅根提取物活性成分分离纯化 9
第五部分活性成分结构鉴定(如NMR、MS) 13
第六部分活性成分抗氧化活性评价 16
第七部分活性成分抗炎活性评价 20
第八部分活性成分靶点筛选(如分子对接) 23
第一部分白茅根提取物总酚含量测定
关键词
关键要点
白茅根提取物总酚含量测定原理
1.总酚含量测定基于福林-西奥卡洛(Folin-Ciocalteu)法,利用总酚类物质与福林试剂作用产生蓝色络合物。
2.络合物的吸光度值与样品中的总酚含量正相关,通过比色法定量测定吸光度值后,参照标准曲线进行换算。
3.测定结果受酚类化合物的种类、浓度、反应条件等因素影响,需进行优化和校正以确保准确性。
白茅根提取物总酚含量影响因素
1.提取溶剂:极性溶剂(如甲醇、乙醇)能有效提取总酚类物质,影响溶剂的极性、提取时间和温度等都会影响总酚含量。
2.植物部位:不同植物部位的总酚含量差异较大,受光照、温度、水分等环境因素影响。
3.提取方法:不同的提取方法(如超声波提取、索氏提取)会导致不同的提取效率和总酚含量。
白茅根提取物总酚含量测定方法
1.试剂配制:配制福林试剂和碳酸钠溶液,确保试剂新鲜和浓度准确。
2.样品处理:将白茅根提取物稀释至适当浓度,并进行离心处理以去除杂质。
3.标准曲线绘制:使用已知浓度的酚类标准品绘制标准曲线,以确定吸光度值与酚含量的关系。
白茅根提取物总酚含量测定注意事项
1.空白对照:进行空白对照实验,以消除试剂自身的影响。
2.平行测定:进行多次平行测定,以提高测定结果的准确性和可信度。
3.计算方法:参照标准曲线,准确计算样品中的总酚含量,并考虑稀释倍数。
白茅根提取物总酚含量前沿技术
1.高效液相色谱法(HPLC):能分离和定量分析不同种类的酚类化合物,提供更全面的信息。
2.质谱联用技术(LC-MS/MS):可对酚类物质进行结构鉴定和定量分析,提高测定特异性。
3.近红外光谱法(NIR):具有快速、非破坏性的特点,可在线实时监测总酚含量变化。
白茅根提取物总酚含量测定
原理
福林-西奥卡洛酚法是一种经典的比色法,用于测定酚类化合物的总含量。该方法利用福林-西奥卡洛酚试剂与酚类物质反应,生成蓝色的钨钼杂多酸,其吸光度与酚类物质的浓度成正比。
试剂
*福林-西奥卡洛酚试剂:混合等体积的福林试剂和西奥卡洛酚试剂。
*碳酸钠溶液:75g/L
*标准酚类溶液:使用没食子酸配制一系列已知浓度的标准溶液。
操作步骤
1.制备样品提取物:称取一定量的白茅根粉末,用适当的溶剂(如甲醇或乙醇)提取。通过过滤或离心分离提取物。
2.反应:向一系列试管中加入不同体积的样品提取物或标准溶液。逐一加入等体积的福林-西奥卡洛酚试剂和碳酸钠溶液。
3.孵育:将试管置于沸水中孵育30分钟,或在室温下孵育2小时。
4.比色:孵育后,冷却试管并测量在765nm处的吸光度。
计算
绘制标准曲线,以标准溶液的浓度为横坐标,其对应的吸光度为纵坐标。利用样品提取物的吸光度,外推至标准曲线上,获得样品中总酚的浓度。
表达式
白茅根提取物总酚含量(以没食子酸当量表示)=样品吸光度值对应标准曲线上的酚类浓度×样品提取物的稀释倍数×1000mg/g
其中:
*样品提取物的稀释倍数=总提取物体积/所用样品量
*1000mg/g为单位换算系数,将结果从mg/mL转换为mg/g干提取物
注意事项
*使用准确的仪器和试剂。
*严格控制反应条件,如温度和孵育时间。
*注意样品提取物浓度范围,超出福林-西奥卡洛酚试剂的线性范围时,需要稀释样品。
*进行多次平行实验以确保结果的准确性。
第二部分白茅根提取物总黄酮含量测定
关键词
关键要点
提取物总黄酮含量测定方法原理
1.黄酮化合物是一种广泛存在于植物中的多酚类化合物,具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等多种生物活性。
2.提取物总黄酮含量测定方法原理基于黄酮化合物与铝盐和碱性溶液反应生成有色络合物的反应。
3.此络合物在特定波长下具有最大吸光度,可通过分光光度法测定其吸光值,从而定量分析提取物中总黄酮含量。
提取物总黄酮含量测定步骤
1.称取一定量的白茅根提取物,溶解于甲醇。
2.加入铝盐和碱性溶液,在恒温条件下反应一段时间。
3.静置冷却,将反应液转移至比色
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