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伴刀豆球蛋白A(ConA)ELISA试剂盒说明书

本试剂仅供争论使用 标本：体液

伴刀豆球蛋白A(ConA)ELISA试剂盒说明书试验原理：

BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附试验〔ELISA〕.BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品参加微孔酶标板内进展检测。先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。人碱性成纤维细胞生长因子

ELISA 检测试剂盒洗涤后，参加亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，

然后参加底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关

系。

伴刀豆球蛋白A(ConA)ELISA试剂盒说明书自备材料

蒸馏水。

加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

振荡器及磁力搅拌器等。安全性

避开直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

试验中不要吃喝、抽烟或使用化装品。

不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

伴刀豆球蛋白A(ConA)ELISA试剂盒说明书操作留意事项

试剂应按标签储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不行保存。

试验中不用的板条应马上放回包装袋中，密封保存，以免变质。

不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

使用一次性的吸头以免穿插污染，吸取终止液和底物A、B液时，避开使用带金属局部的加样器。

使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反响孔中吸水。

底物A应挥发，避开长时间翻开盖子。底物B对光敏感，避开长时间暴露于光下。避开用手接触，

有毒。试验完成后应马上读取OD值。

参加试剂的挨次应全都，以保证全部反响板孔温育的时间一样。

依据中标明的时间、加液的量及挨次进展温育操作。

伴刀豆球蛋白A(ConA)ELISA试剂盒说明书样品收集、处理及保存方法

1、血清-----操作过程中避开任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞快速留神地分别。

2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4、保存------假设样品不马上使用，应将其分成小局部-70 ℃保存，避开反复冷冻。尽可能的不要使

用溶血或高血脂血。假设血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

试剂的预备

标准品：标准品的系列稀释应在试验时预备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。

2．洗涤缓冲液〔50×〕的稀释：蒸馏水50倍稀释。

伴刀豆球蛋白A(ConA)ELISA试剂盒说明书操作步骤

使用前，将全部试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时参加大量的气泡，产生加样上的误差。

依据待测样品数量加上标准品的数量打算所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个

样品依据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

参加稀释好后的标准品50ul于反响孔、参加待测样品50ul于反响孔内。马上参加50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。

假设用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

每孔参加80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。

假设用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

每孔参加底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避开光照。

取出酶标板，快速参加50ul终止液，参加终止液后应马上测定结果。

在450nm波特长测定各孔的OD值。局限

6号标准品以上的结果为非线性的，依据此标准曲线无法得到准确的结果。

伴刀豆球蛋白A(ConA)ELISA试剂盒说明书性能

灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R

值为0.990。

特异性：不与其它细胞因子反响。

重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

伴刀豆球蛋白A(ConA)ELISA试剂盒说明书结果推断与分析

1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

2、以吸光度OD值为纵坐标〔Y〕，相应的BFGF标准品浓度为横坐标〔X〕，做得相应的曲线，样品的BFGF含量可依据其OD值由标准曲