(高清版)BT 40457-2021 咖啡浆果炭疽病菌检疫鉴定方法.pdfVIP

ICS65.020.01

CCSB16

中华人民共和国国家标准

GB/T40457—2021

咖啡浆果炭疽病菌检疫鉴定方法

DetectionandidentificationofColletotrichumkahawaeJ.M.WallerBridge

2021-08-20发布2022-03-01实施

国家市场监督管理总局

国家标准化管理委员会发布

GB/T40457—2021

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC271)提出并归口。

本文件起草单位：宁波检验检疫科学技术研究院、中国科学院微生物研究所、中华人民共和国天津

海关。

本文件主要起草人：段维军、蔡磊、刘芳、李雪莲、张慧丽、赵鹏、廖芳、陈先锋。

I

GB/T40457—2021

咖啡浆果炭疽病菌检疫鉴定方法

1范围

本文件描述了咖啡浆果炭疽病菌形态学和分子生物学特征的鉴定检测方法。

本文件适用于携带咖啡浆果炭疽病菌的植物及其产品中咖啡浆果炭疽病菌的检测。

2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件。

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4分类信息

中文名：咖啡浆果炭疽病菌

：

学名ColletotrichumkahawaeJ.M.Waller.Bridge

分类地位：真菌界(Fungi),子囊菌门(Ascomycota),盘菌亚门(Pezizomycotina),粪壳菌纲(Sordar-

iomycetes),肉座菌亚纲(Hypocreomycetidae),小丛壳目(Glomerellales),小丛壳科(Glomerellaceae),

刺盘孢属(Colletotrichum)。

分布、寄主、传播途径等信息见附录A。

5鉴定原理

根据咖啡浆果炭疽病菌在寄主植物上的症状，抽取可疑样品进行病原菌分离培养，按照病原菌的形

态特征和实时荧光PCR特异性反应进行鉴定。

6仪器设备、器具、试剂和培养基

6.1仪器设备和器具

高压灭菌锅、显微镜、解剖镜、天平、水浴锅、纯水仪、涡旋振荡器、高速冷冻离心机、冰箱、生化培养

箱、实时荧光PCR仪、紫外分光光度计、微量移液器(0.1μL～2.5μL、1μL～10μL、10μL～50μL、

、培、灭菌滤纸。

20μL～200μL、100μL～1000μL)、研钵、锥形瓶养皿、载玻片、盖玻片

6.2试剂

十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)提取液(2%CTAB,1.4mol/LNaCl,20mmol/LEDTA,

、、异丙醇、

100mmol/LTris·HClpH8.0)、三羟甲基氨基甲烷(Tris)饱和酚三氯甲烷、异戊醇75%乙

、