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安徽省立医院检验科质量管理文件质量手册检验方法
项目名称：碱性磷酸酶染色法
检验标本：外周血涂片
收费标准：50元
检验方法：细胞化学染色
原理：在PH9.5时，底物被白细胞的酶水解，释出磷
酸根和芳香萘胺，后者与偶氮盐偶合，形成有
色沉淀。
试剂：1.固定液（保存于4℃）冰箱
2.0.05缓冲液（PH9.4~9.6）保存于4℃冰箱
3.底物
4.二甲基甲酰胺
5.固紫B
操作步骤：1.血片或髓片放置4C固定液中30秒，流水冲
洗，空气晾干
2.工作液：（1）用二甲基甲酰胺溶解底物后，
倒入缓冲液中
（2）再加入固紫B混匀
3.把固定后的玻璃片放入工作液中，置37C水
温箱45分钟
4.流水冲洗
5.苏木精复染
6.流水洗，晾干
7.直接油镜观片
结果：酶活动处呈亮红颗粒
正常参考值：积分10～100分/100个中性分叶核细胞
意义：NAP活性增高见于细菌性感染、类白反应、再
障、某些肿瘤、急性淋巴细胞白血病、慢性粒细胞白血病急性变等。
NAP活性减低见于慢性粒细胞白血病、急性粒细胞白血病、绿色瘤、红白血
病、PNH、病毒感染等。
注意事项：1.外周血涂片标本需新鲜，收到标本后需立即
用专用固定液固定。
2.试剂需防在4℃冰箱内，临用前拿出，试剂打开后需立即应用，最长不得
超过30min。
安徽省立医院检验科质量管理文件质量手册检验方法
项目名称：过氧化物酶染色法
检验标本：骨髓涂片
收费标准：50元
检验方法：细胞化学染色
检验原理：过氧化物酶在细胞内的颗粒从HO中释放出
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氧，氧化联苯胺，引起在过氧化酶活性处，沉
积棕黑色的化合物。
试剂：1.0.3%联苯胺酒精溶液
2.HO溶液（3%HO+蒸馏水5ml）
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操作步骤：1.骨髓涂片加0.3%联苯胺酒精溶液10-15滴
2.一分钟后，加HO溶液10-15滴
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3.五分钟后，流水冲洗
4.再用瑞氏染液复染
5.水洗，晒干
结果：酶活力处呈棕黑色。
意义：急性白血病中可借过氧化物酶染色区蓓别急淋
与急非淋。急淋POX呈阴性反应，FAB分型规定阳性率＜3%。急非淋呈阳性
反应，阳性率≥3%。
注意事项：1.骨髓涂片标本需新鲜，收到标本后需立即染
色。
2.HO需新鲜配制，浓度要适中，过浓、过稀都不可。
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安徽省立医院检验科质量管理文件质量手册检验方法
项目名称：酸性磷酸酶染色法
检验标本：骨髓涂片
收费标准：50元
检验方法：细胞化学染色
原理：同硷性磷酸酶，区别在于底物不同。最重要的
是反应时PH值不同，因而捕获剂（偶氮盐）液不同
试剂：1.固定液（保存于4℃冰箱）
2.0.1M醋酸缓冲液PH5.0
3.底物
4.二甲基甲酰胺
5.盐酸副品红
6.亚硝酸钠
操作步骤：
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