细胞生物学：信号序列.ppt

?ProteinFoldingand

ProcessingintheER◆ProteinfoldingintheER●Bip蛋白∶Bip是一类分子伴侣是重链结合蛋白的简称(heavy-chainbindingprotein)●BiPisthoughttobindtotheunfoldedpolypeptidechainasitcrossesthemembraneandthenmediatesproteinfoldingandtheassemblyofmultisubunitproteinswithintheERBiP蛋白在ER中的作用◆蛋白质在内质网中的加工与修饰●Theformationofdisulfidebondsbetweenthesidechainsofcysteineresidues:proteindisulfideisomerase●N-linkedglycosylation●Additionofglycosylphosphatidylinositol(GPI)anchors●ExportofProteinsfromtheERTheformationofdisulfidebondsN-linkedglycosylationAdditionofGPIanchorsExportofProteinsfromtheER9.3Golgicomplex◆高尔基器(Golgiapparatus)或高尔基复合体(Golgicomplex)◆意大利科学家CamilloGolgi在1898年发现的。9.3.1高尔基体的结构和极性?形态结构连续的整体膜结构。◆扁平囊泡(sacuules)◆小囊泡(vesicle)◆大囊泡(vacuoles)高尔基体的形态结构?高尔基体的极性◆高尔基内侧网络(cis-Golginetwork,CGN)顺面、形成面◆中间潴泡(medialcisternae)◆高尔基外侧网络(transGoljinetwork,TGN)外侧面、成熟面RegionsoftheGolgiapparatus?数量与化学组成◆数量分泌功能越旺盛的细胞,越多。◆蛋白质和脂高尔基复合体高于内质网和质膜:质膜:蛋白质40%,脂60%;内质网:蛋白质20%,脂50-60%;高尔基体:蛋白质60%,脂40%;◆高尔基复合体的标志酶是糖基转移酶。9.3.2高尔基体的功能?蛋白质运输◆ER到高尔基体内侧的运输◆ER蛋白的逆向运输◆高尔基体内侧到高尔基体外侧运输?信号序列(signalsequence)◆研究过程●1960s,GeorgePalade示踪技术研究培养细胞中蛋白质的分泌●Redman和Sabatini用分离的RER小泡研究膜结合核糖体合成的蛋白质去向●1971年美国洛克菲勒大学的Blobel等提出了信号序列(signalsequence)的概念。同位素示踪:分泌途径研究蛋白质进入核糖体实验◆信号序列的间接证据1972年,Milstein和他的同事发现:●从细胞质分离的IgG轻链:多20个氨基酸残基●释放到细胞外的IgG轻链:少20个氨基酸残基◆信号肽的证实G.Blobel等用离体实验证实了信号肽的存在:●RER对产物的影响●蛋白水解酶实验●多聚核糖体的离体翻译体外合成实验多聚核糖体实验?信号肽的特性◆序列特征15-35个氨基酸残基，其中含有4-12个疏水残基◆特异性:◆位置:●N-端突出的一段肽●内含信号肽。?早期信号假说(signalhypothesis)1975年，Blobel等正式提出了信号假说,要点是:◆合成始于游离核糖体;◆N端信号序列靠自由碰撞与内质网膜接触,然后插入内质网的膜;◆蛋白质以袢环形式穿过内质网的膜;◆蛋白的存在方式:●若信号序列被信号肽酶切除:完全进入腔●若是停止转移信号:膜蛋白??信号识别颗粒与停靠蛋白◆signalrecognitionpartical,SRP●SRPisacytosolicribonucleoproteinparticle●Sixdiscretepolypeptides●A300-nucleotideRNA●三个功能域:▲翻译