生物化学：蛋白质的重要性质.ppt

直流过滤模式去除机制-深度孔径拦截污染物膜产品滤出液产品进料液切向流过滤模式去除机制-表面孔径拦截进料液滤出液回流液膜产品产品污染物超滤膜结构1、概念∶ 天然的蛋白质在受到某些物理或化学因素的作用，有序的空间结构被破坏，致使生物活性丧失，并伴随发生一些理化性质的异常变化，但一级结构并未破坏，这种现象称为蛋白质的变性作用（proteindenaturation）。三、蛋白质的变性作用天然状态，有催化活性尿素、β-巯基乙醇去除尿素、β-巯基乙醇非折叠状态，无活性2、蛋白质变性的可逆性∶可逆变性∶是指使蛋白质变性的条件解除后，能恢复其原有性质。不可逆变性∶是指使蛋白质变性的条件解除后，仍不能恢复其原有性质。复性∶去除变性因素后，变性蛋白恢复原来的空间结构，恢复生物活性的现象为复性（renaturation）3、蛋白质的变性因素∶物理因素∶热、高压、UV、X-射线、超声波、表面张力、搅拌、剧烈振荡、研磨化学因素∶酸、碱、有机溶剂、重金属盐、脲、胍、表面活性剂、生物碱。4、变性蛋白质的性质∶变性蛋白质与天然蛋白质性质的差别主要表现在∶ (1)理化性质的变化 如：旋光性改变、粘度增加、光吸收性质增加、失去结晶能力、溶解度下降、易发生凝聚和沉淀。 (2)生化性质的变化 变性后的蛋白质易被酶水解。 (3)生物活性丧失 这是蛋白质变性的重要标志。5、蛋白质变性机理的应用 （1）利用变性：酒精消毒高压灭菌 （2）防止变性：低温保存生物制品 （3）取代变性：乳品解毒(用于急救重金属中毒)四、蛋白质的变构作用 对于具有四级结构、含有亚基的蛋白质来讲，当一个亚基的构象发生变化，而引起其余亚基和整个蛋白质分子构象、性质和功能发生改变的作用称为蛋白质的变构作用(或称别构作用allostericeffect)。如∶血红蛋白的变构作用五、蛋白质的沉降作用（自学）∶1、概念∶ 蛋白质在离心力场中，由于其比重大于水，而下沉，这就是蛋白质的沉降作用。60000~80000转/分重力60万～80万倍2、蛋白质的沉降常数(沉降系数)∶不同的蛋白质由于其分子大小不同，在一定的离心力场中沉降的速度也不同。沉降的速度是蛋白质在单位时间内下沉的距离，即v=dx/dt。沉降常数(s小写)∶单位引力场中沉降分子的下沉速度。它表示沉降分子的大小特性。 s=v/ω2x沉降常数是蛋白质的特征性常数，它反应蛋白质分子的大小。由于已知的蛋白质分子的沉降常数在1×10-13～200×10-13秒之间，当蛋白质浓度为0时，沉降常数为1×10-13，故将1×10-13用1个Svedberg单位表示(简写为1S，大写)。蛋白质的相对分子量与沉降常数的关系是∶ M=RTs/D(1-νρ) M∝s D：扩散系数； ν：蛋白质的偏微比容（0.74cm3/g）； ρ：溶剂的密度六、蛋白质的水解反应∶完全水解产物是氨基酸。不完全水解产物可以是胨、小肽、二肽和氨基酸。第四节蛋白质的重要性质一、蛋白质的两性解离与等电点蛋白质中可解离的酸性基团∶Glu的γ-COOHAsp的β-COOHTyr的酚羟基Cys的自由巯基碱性基团∶Lys的ε-NH2His的咪唑基Arg的δ-胍基蛋白质的等电点∶蛋白质溶液在特定的pH下，其分子所带的正、负电荷相等，净电荷为零，这一pH称为(用pI表示)。蛋白质分子除两端的氨基和羧基可解离外，氨基酸残基侧链中某些基团，在一定的溶液pH条件下都可解离成带负电荷或正电荷的基团。根据蛋白质两性解离和等电点的性质发展起来的蛋白质纯化方法有∶等电点沉淀法蛋白质电泳（电荷的性质、强弱和多少）离子交换法（电荷的性质、强弱和多少）pHPIpH=PIpHPI等电点沉淀法电泳法蛋白质在高于或低于其pI的溶液中为带电的颗粒，在电场中能向正极或负极移动。这种通过蛋白质在电场中泳动而达到分离各种蛋白质的技术,称为电泳。等电点聚焦二、蛋白质的胶体性质真溶液的溶质分子的颗粒大小1nm；胶体溶液中溶质分子的颗粒大小在1-100nm；蛋白质分子的相对分子量在1-100万，其颗粒大小(2-20nm)属于胶体粒子的范围。另外，蛋白质分子表面有许多极性基团，亲水性极强，易溶与水形成稳定的亲水胶体溶液。1、稳定蛋白质胶体溶液的两个因素∶(1)表面净电荷(在非等电点时)，构成双电层(2)水化膜+++++++带正电荷的蛋白质