显微镜技术——普通光镜.docx

第一章显微镜技术

细胞很微小，但构造格外简单。绝大多数细胞只能借助显微镜才能观看到，细胞的微小构造要用电镜以及特别的显微镜才能显示不来。细胞生物学的进展，正如其他的试验学科一样，在很大程度上依靠于争论技术与工具的改进。假设说显微镜的消灭为细胞学及细胞学说的建立奠定了根底的话，则电子显微镜的应用及其与分子生物学技术的结合在细胞生物学的进展方面则起了打算性的作用。

细胞的觉察与光学显微镜的制造是分不开的。据历史记载，12世纪阿拉伯人阿尔海琴已会磨制透镜。1604年荷兰眼镜商Janssen〔1588-1628〕制造了第一台放大率不超过10倍的复式显微镜。半个多世纪后，英国物理学家Hooke〔1663-1703〕创制了第一架具有科学争论价值的显微镜，首次观看了木栓的显微图像，并觉察了细胞。真正观看到活细胞的是荷兰科学家Leeuwenhoek〔1632-1723〕，他用自制的显微镜观看到了池塘水中的原生动物，还有人和哺乳动物的精子、细菌等。

显微镜是观看微观世界的重要工具，没有它也就无法翻开微观世界的大门。随着现代科学技术的进展，显微镜的种类越来越多，性能更加完善，使用范围也越来越广泛，不仅可以用来观看细胞形态和内部构造，而且，还可以通过与其他技术的结合，进展细胞化学成分的定位、定性、定量以及物质代谢、细胞生理、免疫和遗传等功能方面的争论。可以说，显微镜是生物学、医学争论中用途最广的一类仪器。因此，学习和把握一般光学显微镜的构造原理和操作方法，是每个现代生物学、医学等专业学生必需把握的根本技能。

本章将介绍常用的一般光学显微镜和特别显微镜的构造、原理、应用等。

试验一一般光学显微镜的使用

背景学问：

1、显微镜的进展历史

很早以前，人们就知道某些光学装置能够“放大”物体。如《墨经》中记载了能放大物体的凹面镜。光学显微镜是利用光线照明使微小物体形成放大影像的仪器。显微镜的制造和使用已有400多年的历史。

1595年，荷兰人Janssen制造了第一个简陋的复式显微镜，由三个镜筒连接而成，放大倍数是3~10倍。复式显微镜在性能上明显优于单式显微镜。一是它的放大率可以做得很高；二是制造工艺较简洁。复式显微镜的制造，是科学史上的里程碑，人类从今开头生疏微

观世界。

2、细胞的觉察

1665年，英国科学家Hooke用其自制的显微镜观看软木切片的时候，惊异的觉察其中存在着一个一个“单元”构造。Hooke把它们称作“cell”，即细胞。

真正观看活细胞的是荷兰科学家列文·虎克〔AnthonyvonLeeuwenhoek，1632-1723〕。他在1677年观看池塘水中的原生动物、

蛙肠内的原生动物、人类和哺乳类动物的精子；后又在鲑鱼的血液中看到红细胞的核。他最先觉察了细菌，从而开创了微生

物学。他还指出：在全部露天积水中都可以找到微生物。这是人类生疏微生物的分布的一次进步。他又通过事实证明白当时流行的生物自然发生论的错误，转变了人们的观念。

3、现代显微镜技术

二十世纪物理、数学和材料科学等领域取得了格外大的进展，各种型的显微镜应运而生，如倒置显微镜、偏光显微镜、

图1-1ErnstRuska、GerdBinnig和HeinrichRohrer

〔从左至右〕分别因制造电子显微镜和扫描隧道显微镜而共享1986年的诺贝尔物理学奖

荧光显微镜、相差显微镜、微分干预显微镜等、电子显微镜、共焦激光扫描显微镜〔CLSM〕和扫描隧道电子显微镜〔STM〕。各种的试验技术也相继消灭。细胞的精细构造如细胞骨架，遗传物质、各种病毒粒子和蛋白质分子也被人们看到。

一、试验目的

生疏一般光学显微镜的主要构造和各部件根本性能。

把握低倍镜、高倍镜的正确使用方法，生疏油镜的使用方法。

初步了解光学显微镜的维护方法。二、试验原理

一般光学显微镜〔microscope〕是最通用的一种光学显微

图1-2显微镜的成像光路图镜。利用光线照明，标本中各点依其光吸取〔即光的振幅发生变化〕的不同而在光明的背景中成像。它由物镜、目镜、聚光镜、光源、载物台和支架等部件组成。显微镜的根本放大原理如图1-2。其放大作用主要由两组放大系统组成，一组为焦距很短的物镜，另一组为焦距较长的目镜。为了削减像差，显微镜的目镜和物镜各由多组透镜构成，其中物镜的构造尤为简单，有的由16个透镜组成。为便于说明，图中的物镜和目镜都简化为单透镜。物体AB位于物镜的前焦点外但很靠近焦点的位置上，首先经过物镜形成放大的倒立实像A”B”，这个像位于目镜的物方焦距内但很靠近焦点的位置上，作为目镜的物体。目镜将物镜放大的实像又二次放大成虚像A””B””，位于观看者的明视距离〔距人眼250mm〕处，供眼晴观看。

图1-2显微镜的成