生物化学实验层析技术和原理.pdfVIP

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层析技术

一、层析技术是利用混合物中各组分理化性质的差别(分子

亲和力、吸附力、分子的形状和大小、分配系数等),

使各组分以不同程度分布在两个相,其中一个是固定

相,另一个是流动相,从而使各组分以不同速度移动而

使其分离的方法。

二、常用的层析技术有亲和层析、吸附层析、凝胶过滤层析、

离子交换层析、分配层析五种。

层析方法分类表

层析名称依据被分离物操作方式层析类型

的理化性质

固流装置

定动

相相

吸附层析吸附力固液柱柱层析

玻薄层层析

液相色谱仪高压液相层析

气相色谱仪气相层析

分配层析分配系数固液柱柱层析

纸纸层析

玻薄层层析

分液漏斗液相层析

液相色谱仪高压液相层析

气相色谱仪气相层析

离子交换离子间的亲和固液柱柱层析

层析力玻薄层层析

液相色谱仪高压液相层析

凝胶过滤分子大小固液柱柱层析

层析玻薄层层析

液相色谱仪高压液相层析

亲和层析生物高分子亲柱柱层析

和力

1

三、柱层析的设备与操作:柱层析是指将固定相装填于柱中

进行层析的方法。优点被分离物质可多可少,既可

用于定性定量分析也可用于物质的制备。

1、柱层析的设备

柱层析的基本设备有层析柱,恒流装臵(恒流泵,它可以产生均一

的流速,并且流速是可调的)和接收装臵。

(l)层析柱层析柱一般为玻璃管制成,其下端为细口,出口

处带有玻璃烧结板或尼龙网。柱的直径和长度之比是1:10~40

层析柱的内壁直径大于1cm,以防产生“管壁效应”,即由于流

动分子在柱中心移动慢,沿管壁移动快,而使区带成为凸形的现

象。当层析的目的是要把小分子物质分离开,则层析柱体积应是

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