不同提取方法对软枣猕猴桃多糖单糖组成及抗氧化活性的影响.docxVIP

不同提取方法对软枣猕猴桃多糖单糖组成及抗氧化活性的影响

宣丽;刘长江

【摘要】采用高温水提工艺、低温水提工艺和微波辅助工艺从软枣猕猴桃中提取得到三种多糖,依次命名为AAP-1、AAP-2和AAP-3,对三种多糖的理化性质、单糖组成和抗氧化活性进行了研究.理化性质鉴定结果表明:三种多糖均不含酚羟基及还原糖,都含有一定量的糖醛酸和蛋白质,AAP-1含有淀粉,AAP-2和AAP-3不含淀粉;单糖组成结果表明:三种多糖均由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖7种单糖组成,其中,AAP-1葡萄糖的摩尔百分含量最高,为94.72％;AAP-2半乳糖和阿拉伯糖的摩尔百分含量较高,分别为24.75％、38.37％;AAP-3半乳糖醛酸的摩尔百分含量较高,为16.05％.抗氧化实验结果表明:AAP-1抗氧化活性最弱;AAP-3抗氧化活性最强,其清除DPPH自由基和羟基自由基的IC50分别为1.2、2.7mg/mL.

【期刊名称】《天然产物研究与开发》

【年(卷),期】2013(025)009

【总页数】6页(P1260-1265)

【关键词】软枣猕猴桃多糖;提取方法;单糖组成;抗氧化活性

【作者】宣丽;刘长江

【作者单位】沈阳农业大学食品学院,沈阳110866;沈阳农业大学食品学院,沈阳110866

【正文语种】中文

【中图分类】R284.2

软枣猕猴桃［Actinidiaarguta(Sieb.etZucc.)Planch.exMiq.］别名软枣子、猕猴梨、藤梨，是猕猴桃科、猕猴桃属多年生落叶藤本植物。在我国分布于东北、华北、山东、西北及长江流域，其中，东北南部山区较多见［1］。软枣猕猴桃以其耐寒性而著称，果实很小，如枣般大，表皮光滑无毛，可直接食用，甜酸比适中，风味极佳［2］。它富含多种营养成分，如高VC含量(200～400mg/100g)、高活性的蛋白酶、种类齐全的微量元素［3］、丰富的不饱和脂肪酸含量［4］等。其果实、种子及根茎均可入药［5］，是理想的绿色食品和食疗食品。多糖是软枣猕猴桃中主要成分之一，对其进行深入研究对于软枣猕猴桃的开发利用有重要意义。本文以软枣猕猴桃鲜果为原料，采用高温、低温和微波三种不同方法提取多糖，然后对其单糖组成及抗氧化活性进行研究，以期为软枣猕猴桃多糖的构效分析提供一定的试验依据和理论基础。

1材料与仪器

软枣猕猴桃鲜果，采自辽宁省抚顺山区;1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)、1，1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)购自Sigma公司;单糖标准品:鼠李糖(Rha)、阿拉伯糖(Ara)、甘露糖(Man)、葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)、葡萄糖醛酸(GlcA)及半乳糖醛酸(GalA)购自国药集团化学试剂有限公司;乙腈、甲醇为色谱纯;其余试剂为国产分析纯。

U-2910型紫外可见分光光度计(日立先端科技股份有限公司);Heto-LL3000冻干机(赛默飞世尔科技公司);TSQ-280摇床(上海精宏仪器有限公司);HC23B-AV型微波炉(上海新仪微波化学科技有限公司);HH-4数显恒温水浴锅(金坛市杰瑞尔电器有限公司);5805型高速冷冻离心机(德国艾本德公司);RE-52AA旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂);Waters高效液相色谱仪(美国Waters公司);C18色谱柱(赛默飞世尔科技公司)。

2实验方法

2.1软枣猕猴桃多糖的制备

准确称取300g软枣猕猴桃鲜果，洗净破碎后，采用确定的乙醇除杂工艺:乙醇浓度80%，浸泡时间60min，料液比1∶2(g∶mL)，去除软枣猕猴桃果中大量的色素类杂质及还原糖，抽滤，弃去上清液，沉淀部分称重后平均分成3份，一份采用高温水提工艺:水浴温度100℃、料液比1∶9(g∶mL)、水浴时间2h;一份采用低温水提工艺:摇床温度40℃、料液比1∶9(g∶mL)、振摇时间2h、转速180rpm;一份采用微波辅助提取工艺:料液比1∶9(g∶mL)、微波功率500W、微波处理时间10min，提取结束后，离心获得的上清液分别进行减压浓缩，然后用4倍体积的无水乙醇沉淀，4℃冷藏过夜，沉淀离心后依次用石油醚、丙酮、无水乙醇浸泡洗涤，抽滤后冷冻干燥，分别得高温提取的软枣猕猴桃多糖AAP-1、低温提取的软枣猕猴桃多糖AAP-2、微波提取的软枣猕猴桃多糖AAP-3，根据公式:多糖得率/%=多糖质量/鲜果质量×100，分别计算三种方法提取的软枣猕猴桃多糖的得率。

2.2不同方法提取的软枣猕猴桃多糖理化性质的比较

精确称取AAP-1、AAP-2、AAP-3各0.5g，用80mL蒸馏水复溶，溶液用布氏漏斗抽滤，滤液转移至100mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀后得质量浓度为5mg/mL的多糖溶液。通