白细胞介素10的编码基因及其在大肠杆菌中的表达方法.pdfVIP

白细胞介素10的编码基因及其在大肠杆菌中的表达方法.pdf

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(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利说明书

(10)申请公布号CN1687415A

(43)申请公布日2005.10.26

(21)申请号CN200510073384.0

(22)申请日2005.06.02

(71)申请人中国科学技术大学

地址233026安徽省合肥市金寨路96号

(72)发明人田志刚张慰慈肖卫华魏海明

(74)专利代理机构北京纪凯知识产权代理有限公司

代理人关畅

(51)Int.CI

C12N15/24

C12N15/63

C12N15/70

权利要求说明书说明书幅图

(54)发明名称

白细胞介素10的编码基因及其在

大肠杆菌中的表达方法

(57)摘要

本发明公开了一种白细胞介素10

基因及其在大肠杆菌中的表达方法。该基

因是下述核苷酸序列之一:1)序列表中

SEQID№:1的DNA序列;2)序列表中

SEQID№:2的DNA序列;3)在高严谨条

件下可与序列表中SEQID№:1或SEQ

ID№:2限定的DNA序列杂交的核苷酸序

列。一种白细胞介素10的表达方法,是构

建含有序列表中SEQID№:1或SEQID

№:2DNA序列的大肠杆菌表达载体,将

构建的大肠杆菌表达载体导入大肠杆菌

中,获得重组大肠杆菌,发酵重组大肠杆

菌得到白细胞介素10。本发明为高效、大

量、低成本生产白细胞介素10提供了一种

有效方法,具有较高的实际应用价值。

法律状态

法律状态公告日法律状态信息法律状态

未缴年费专利权终止IPC(主分

类):C12N15/24专利

2022-05-17号:ZL2005100733840申请专利权的终止

日权公告

权利要求说明书

1、白细胞介素10基因,是下述核苷酸序列之一:

1)序列表中SEQID№:1的DNA序列;

2)序列表中SEQID№:2的DNA序列;

3)在高严谨条件下可与序列表中SEQID№:1或SEQID№:2限定的DNA序列

杂交的核苷酸序列。

2、根据权利要求1所述的白细胞介素10基因,其特征在于:所述基因具有序列表

中SEQID№:1的DNA序列。

3、根据权利要求1所述的白细胞介素10基因,其特征在于:所述基因具有序列表

中SEQID№:2的DNA序列。

4、含有权利要求1或2或3所述基因的表达载体、转基因细胞系及宿主菌。

5、一种白细胞介素10的表达方法,是构建含有序列表中SEQID№:1或

SEQID№:2DNA序列的大肠杆菌表达载体,将构建的大肠杆菌表达载体导入大

肠杆菌中,获得重组大肠杆菌,发酵重组大肠杆菌得到白细胞介素10。

6、根据权利要求5所述的方法,其特征在于:所述用于构建大肠杆菌表达载体的

出发载体为pCRT7/CT-TOPO或pET101/D-TOPO。

7、根据权利要求6所述的方法,其特征在于:所述用于构建大肠杆菌表达载体的

出发载体为pCRT7/CT-TOPO。

8、根据权利要求7所述的方法,其特征在于:所述构建的重组大肠杆菌表达载体

为pCRT7/CT-TOPO/ILRP或pCRT7/CT-TOPO/ILRP5’。

9、根据权利要求5或6或7或8所述的方法,其特征在于:所述大肠杆菌为

E.coliBL21-Gold(DE3)、E.coliBL21(DE3)、E.col

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