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(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利说明书
(10)申请公布号CN1687415A
(43)申请公布日2005.10.26
(21)申请号CN200510073384.0
(22)申请日2005.06.02
(71)申请人中国科学技术大学
地址233026安徽省合肥市金寨路96号
(72)发明人田志刚张慰慈肖卫华魏海明
(74)专利代理机构北京纪凯知识产权代理有限公司
代理人关畅
(51)Int.CI
C12N15/24
C12N15/63
C12N15/70
权利要求说明书说明书幅图
(54)发明名称
白细胞介素10的编码基因及其在
大肠杆菌中的表达方法
(57)摘要
本发明公开了一种白细胞介素10
基因及其在大肠杆菌中的表达方法。该基
因是下述核苷酸序列之一:1)序列表中
SEQID№:1的DNA序列;2)序列表中
SEQID№:2的DNA序列;3)在高严谨条
件下可与序列表中SEQID№:1或SEQ
ID№:2限定的DNA序列杂交的核苷酸序
列。一种白细胞介素10的表达方法,是构
建含有序列表中SEQID№:1或SEQID
№:2DNA序列的大肠杆菌表达载体,将
构建的大肠杆菌表达载体导入大肠杆菌
中,获得重组大肠杆菌,发酵重组大肠杆
菌得到白细胞介素10。本发明为高效、大
量、低成本生产白细胞介素10提供了一种
有效方法,具有较高的实际应用价值。
法律状态
法律状态公告日法律状态信息法律状态
未缴年费专利权终止IPC(主分
类):C12N15/24专利
2022-05-17号:ZL2005100733840申请专利权的终止
日权公告
日
权利要求说明书
1、白细胞介素10基因,是下述核苷酸序列之一:
1)序列表中SEQID№:1的DNA序列;
2)序列表中SEQID№:2的DNA序列;
3)在高严谨条件下可与序列表中SEQID№:1或SEQID№:2限定的DNA序列
杂交的核苷酸序列。
2、根据权利要求1所述的白细胞介素10基因,其特征在于:所述基因具有序列表
中SEQID№:1的DNA序列。
3、根据权利要求1所述的白细胞介素10基因,其特征在于:所述基因具有序列表
中SEQID№:2的DNA序列。
4、含有权利要求1或2或3所述基因的表达载体、转基因细胞系及宿主菌。
5、一种白细胞介素10的表达方法,是构建含有序列表中SEQID№:1或
SEQID№:2DNA序列的大肠杆菌表达载体,将构建的大肠杆菌表达载体导入大
肠杆菌中,获得重组大肠杆菌,发酵重组大肠杆菌得到白细胞介素10。
6、根据权利要求5所述的方法,其特征在于:所述用于构建大肠杆菌表达载体的
出发载体为pCRT7/CT-TOPO或pET101/D-TOPO。
7、根据权利要求6所述的方法,其特征在于:所述用于构建大肠杆菌表达载体的
出发载体为pCRT7/CT-TOPO。
8、根据权利要求7所述的方法,其特征在于:所述构建的重组大肠杆菌表达载体
为pCRT7/CT-TOPO/ILRP或pCRT7/CT-TOPO/ILRP5’。
9、根据权利要求5或6或7或8所述的方法,其特征在于:所述大肠杆菌为
E.coliBL21-Gold(DE3)、E.coliBL21(DE3)、E.col
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