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ICS65.020.01CCSA017
T/NAIA
团体标准
T/NAIA0293—2024
枸杞中5种黄酮类化合物的测定液相色谱法
2024-05-31发布2024-06-10实施
宁夏化学分析测试协会发布
T/NAIA0293-2024
I
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。
本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。
本文件起草单位:宁夏回族自治区食品检测研究院(国家市场监管重点实验室(枸杞和葡萄酒质量安全))、宁夏回族自治区标准化研究院、宁夏化学分析测试协会、宁夏农产品质量标准与检测技术研究所。
本文件主要起草人:李瑞雪、王泽岚、朱捷、龚慧、路敏、王琛、王紫昕、刘继辉、陈盼盼、吴明、吕毅、马桂娟、葛谦、张小飞。
本文件为首次发布。
T/NAIA0293-2024
1
枸杞中5种黄酮类化合物的测定液相色谱法
1范围
本文件规定了枸杞中5种黄酮类化合物含量的液相色谱法。
本文件适用于枸杞(鲜果)中杨梅素、二氢杨梅素、木犀草素、柚皮素、芸香柚皮素含量的测定和确证。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4原理
样品经甲醇溶液提取,超声离心,用配有紫外检测器或二极管阵列检测器的液相色谱仪测定,以保留时间定性,外标法定量。
5试剂和材料
除另有说明,所用试剂均为分析纯,水为符合GB/T6682规定的一级水。
5.1试剂
5.1.1乙腈(CH3CN):色谱纯。
5.1.2甲醇(CH3OH):色谱纯。
5.2试剂配制
5.2.170%甲醇溶液:准确量取700mL甲醇(5.1.2)至1000mL容量瓶中,用水定容。
5.3标准品
5.3.1杨梅素(CAS号:529-44-2):纯度≥95%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准品。
5.3.2二氢杨梅素(CAS号:27200-12-0):纯度≥95%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准品。
5.3.3木犀草素(CAS号:491-70-3):纯度≥95%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准品。
5.3.4芸香柚皮素(CAS号:14259-46-2):纯度≥95%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准品。
5.3.5柚皮素(CAS号:480-41-1):纯度≥95%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准品。
T/NAIA0293-2024
2
5.4标准溶液制备
5.4.1标准储备液(10mg/mL):准确称取适量的标准物质(5.3),分别用甲醇(5.1.2)制备浓度为10mg/mL的标准储备液。标准储备液在-18℃及以下避光保存。
5.4.2混合标准中间液(1mg/mL):吸取上述标准储备液(5.4.1)各1mL于10mL容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀,制备浓度为1mg/mL混合标准中间液。
5.4.3标准系列工作液:移取适量混合标准中间液(5.4.2),用70%甲醇溶液(5.2.1)稀释成浓度为1.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL、50.0μg/mL、100.0μg/mL的混合标准工作溶液。临用现配。
6仪器和设备
6.1液相色谱仪:带紫外检测器或二极管阵列检测器。
6.2分析天平:感量为0.00001g和0.001g。
6.3高速冷冻离心机:15000r/min。
6.4涡旋混合器。
6.5超声波振荡器。
6.6高速粉碎机:转速不低于10000r/min。
6.7微孔滤膜:0.45μm,有机相。
7分析步骤
7.1试样制备
枸杞(鲜果):样品用组织捣碎机制成匀浆(200g样品匀浆时间约为30s),置于样品瓶中,-18℃冷冻备用。
7.2试样的提取
称取5g(精确至0.01g)试样于50mL塑料离心管中,加入20mL70%甲醇溶液(5.2.1),涡旋混匀1min,超声提取20min。转入25mL容量瓶中,用70%甲醇溶液(5.2.1)定容至刻度并充分混匀后,转入离心
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