原创力文档- 1、本文档共46页，可阅读全部内容。
- 2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
TransgenicTechnology;Definition
TransgenictechnologyreferstothegeneticengineeringofanorganismsothatitsgenomicDNAisalteredtoover-orunderexpresscertaingenes.;Transgenictechnique
GeneKnockOut
GeneKnockIn
GeneKnockDown
GeneTrapping
mouse,rabbit,rat,sheep,pig,cawetc.;TheNobelPrizeinphysiologyormedicineisawardedfortheirdiscoveriesofprinciplesforintroducingspecificgenemodificationsinmicebytheuseofembryonicstemcells.
;Evans’swork:TheEScells; MarioCapecchiandOliverSmithies,independentlyofeachother,discoveredhowhomologousrecombinationbetweensegmentsofDNAmoleculescanbeusedtotargetgenesinthemammaliangenomeanddevelopedmethodstogenerategeneticallymodifiedmice.;转基因小鼠构建过程;北京诺兰信科技
北京高校生物技术转化平台;/;转基因动物技术专家讲座;转基因动物技术专家讲座;转基因动物技术专家讲座;;转基因动物技术专家讲座;定点突变技术;;分子开关--Cre/Loxp系统;Cre-LoxP系统特征;两个loxp位点方向相反;转基因动物技术专家讲座;Knock-outgene
Knock-outstopcassette
Knock-outlabel;转基因动物技术专家讲座;转基因动物技术专家讲座;FLP/frt重组系统;时间控制和组织特异性表示;转基因动物技术专家讲座;转基因动物技术专家讲座;LSL-Cre:loxp-stop-loxp,Cre
FSF-Flpo:FRT-stop-FRT,Flpo
EstablishedLungTumors;;HSV-tk：单纯疱疹病毒胸苷激酶，自杀基因
HSV－tk基因产物使细胞能利用培养基中GANC(Gancyclovir，丙氧鸟苷）而死亡
比如将在肝癌细胞中可表示AF基因调控区与水痘一带状疮疹病毒中胸苷激酶（VZV-TK）基因进行重组，构建逆转录病毒载体导入体内，TK基因只在肝癌细胞中表示，产生TK可催化6-甲基嘌呤阿拉伯糖核苷磷酸化产生araAMP，深入磷酸化形成细胞毒物质araATP，杀死肝癌细胞。;Neo基因
卡那霉素抗性基因编码是新霉素磷酸转移酶II，基因记做neo，能经过降解G418、新霉素和卡那霉素来实现真核和原核细胞对应抗性。
普通应用于原核生物就是卡那霉素抗性基因,应用于真核生物就是G418抗性。
;外源基因导入ES细胞方法有:
1.电穿孔法
2.逆转录病毒载体法
3.脂质体包装法
4.磷酸钙沉淀法;转基因动物技术专家讲座;三、囊胚注射和杂交筛选;转基因动物技术专家讲座;小鼠基因型判定？;;129和C57BL/6纯系小鼠
近交系InbredMice;;表1.用基因打靶法制备一系列主要基因敲除小鼠及表型：
敲除基因表现型
RAG-1和/或RAG-2因无TcR基因重排而无T细胞
TcRβ双阴性胸腺细胞聚集，双阳性胸腺细胞极少，TcRα正常重排
TcRα有双阴和双阳T细胞而无单阳性T细胞
P56lckT细胞发育在早期双阳性成熟期受阻，无?δT细胞
CD3-ζT细胞发育在早期双阳性成熟期受阻
CD45T细胞发育在双阳性成熟期受阻
MHC-Ⅱ,不变链
文档评论（0）