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?变式训练1.凝胶色谱法分离蛋白质的原理依据是()A.根据蛋白质分子与凝胶的亲和力的大小B.根据蛋白质相对分子质量的大小C.根据蛋白所带电荷的多少D.根据蛋白质溶解度的大小解析:凝胶色谱法是根据蛋白质相对分子质量的大小分离蛋白质的一种方法。答案:B二、血红蛋白的提取和分离的实验操作1.样品处理(1)红细胞的洗涤:洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白。采用低速短时间离心,吸出上层透明的黄色血浆,再加入五倍体积的生理盐水,重复洗涤三次,直至上清液中没有黄色,表明红细胞已洗涤干净。洗涤次数过少,无法去除血浆蛋白;离心速度过高和时间过长会使白细胞和淋巴细胞一同沉淀,达不到分离的效果。(2)血红蛋白的释放:红细胞在蒸馏水和甲苯的作用下破裂,释放出血红蛋白。(3)分离血红蛋白溶液:将混合液进行离心后,会明显看到试管中的溶液的分层情况:第3层的红色透明液体是血红蛋白的水溶液。(4)透析:目的是除去样品中的相对分子质量较小的杂质。2.凝胶色谱操作(1)凝胶色谱柱的装填:①装填前,凝胶用蒸馏水或者洗脱液充分溶胀。②凝胶装填要均匀,色谱柱内不能有气泡,一旦发现存在气泡,必须重装。③装填完后,立即用300mL20mmol/L磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶,使凝胶装填紧密。(2)样品的加入和洗脱:①加样前,打开色谱柱下端的流出口,使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到与凝胶面平齐,关闭出口。②按正确方法加样,不能破坏凝胶面。③进行洗脱时,等红色蛋白质接近色谱柱底端时,采用试管收集。例2-聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入SDS的作用是()A.增大蛋白质的相对分子质量B.改变蛋白质分子的形状C.掩盖不同蛋白质分子间的电荷差别D.减少蛋白质分子的相对分子质量解析:SDS是阴离子去污剂,作为变性剂和助溶试剂,它能断裂分子内和分子间的氢键,使分子去折叠,破坏蛋白质分子的二、三级结构。在样品和凝胶中加入还原剂SDS后,分子被解聚成多肽链,解聚后的氨基酸侧链和SDS结合成蛋白-SDS复合物,SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量,这样就消除了不同分子间的电荷差异,使电泳迁移率完全取决于分子的大小。答案:C?变式训练2.在利用凝胶电泳法分离蛋白质时,一定要加入缓冲溶液,起到的作用是()A.使酶的活性最高B.使蛋白质的活性最高C.维持蛋白质所带电荷D.使蛋白质带上电荷解析:加缓冲液的目的是维持蛋白质所带电荷不发生改变,而不是使蛋白质带上电荷。答案:C本节小结核心归纳1.凝胶色谱法分离蛋白质取决于相对分子质量的大小,相对分子质量大的路程较短,移动速度快;相对分子质量较小的,路程较长,移动速度慢。2.缓冲液能在一定范围内抵制外界酸、碱对溶液pH的影响,维持pH基本不变。3.电泳时,带电分子会向其所带电荷相反的电极移动。4.蛋白质的提取和分离一般分为四步:样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。5.血红蛋白溶液离心后分为四层,从上到下依次为:无色透明的甲苯层、白色薄层固体(脂溶性物质的沉淀层)、红色透明液体(血红蛋白的水溶液)和其他杂质的暗红色沉淀物。背景八年级中国历史上册单元复习第二单元近代化的起步中华民族的屈辱史中国人民的抗争、探索史鸦片战争(1840—1842)第二次鸦片战争(1856—1860)甲午中日战争(1894—1895)八国联军侵华战争(1900)日本侵华战争(局部侵华1931—1936;全面侵华1937—1945)农民阶级:太平天国运动;义和团运动地主阶级(洋务派):洋务运动资产阶级(维新派):戊戌变法资产阶级(革命派):辛亥革命激进民主主义者:新文化运动中国近代化的探索所谓“近代化”,即是中国人民向西方资本主义学习,寻求新的出路的过程。无产阶级(中共):新民主主义革命中国近代史近代化的起步近代化,指的是近代史上中国人民不断学习西方,寻求中国新的发展出路的过程。它是一个艰难曲折的探索历程,主要经历了由技术到制度再到思想文化这一过程。单元特征:中国近代化的基本进程,是从洋务派为富国强兵、以图自救而创办近代军事和民用工业的洋务运动开始,经康有为、梁启超维新派发动具有资产阶级性质的政治改革运动,继而孙中山领导革命派开创完全意义上的近代资产阶级民主革命,到新文化运动掀起对封建思想文化批判的思想解放运动,近代中国各种政治力量追求近代化的进程一刻也未曾停留。

学技术(器物):学制度:学思想文化:洋务运动戊戌变法辛亥革命新文化运动近代化的探索经济工业化政治民主化思想科学化﹙19世纪60年代至20世纪初﹚﹙封建地主阶级﹚﹙资产阶级维新派

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