wb原理步骤及总结.docx

试验原理蛋口质印迹是把电泳分别的蛋口质转移到固定基质上，然后利用抗原抗体反响来检测特异性的蛋白分子的技术，包括三个局部：SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳，蛋白质的电泳转移，免疫印迹分析。

SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳主要用于测定蛋白质相对分子质量，SDS是阴离子去污剂，能断裂蛋白质分子内和分子间的氢键，使分子去折叠，破坏其高级构造。SDS与大多数蛋口质的结合比为1.4:1,山于SDS带有大量的负电荷，与蛋白质结合时掩盖了不同种类蛋白质间原有的电荷差异，使各种蛋口质带有一样密度的负电荷，形似长椭圆棒，蛋白迁移率与蛋白质相对分子质量的对数呈线性关系。因此，利用相对分子质量标准蛋口所作