Westernblot实验目的western技术是用来检测蛋白表达的特定的.docx

Westernblot

试验目的

western技术是用来检测蛋白表达的特定的灵敏的方法。

原理

与Southern或Northern杂交方法类似，但WesternBlot承受的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过分别的蛋白质样品，转移到固相载体〔例如硝酸纤维素薄膜〕上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分别的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反响，再与酶或同位素标记的其次抗体起反响，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分别的特异性目的基因表达的蛋白成分