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医疗机构临床基因扩增检验实

验室工作导则

医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则

一，临床基因扩增检验实验室的设计

（一）临床基因扩增检验实验室区域设计规划。

原则上临床基因扩增实验室应当设置以下区域：

试剂储存和准备区，标本制备区，扩增区，扩增

产物分析区。这四个区域在物理空间上必须是完

全相互独立的，各区域无论是在空间上还是在使

用中，应当始终处于完全的分割状态，不能有空

气的直接相通。根据使用仪器的功能，区域可适

当合并。例如使用实时荧光PCR仪，扩增区，

扩增产物分析区可合并；采用标本处理，核酸提

取及扩增检测为一体的自动化分析仪，则标本制

备区，扩增区，扩增产物分析区可合并。各区的

功能是：

1，试剂储存和准备区：贮存试剂的制备，

试剂的分装和扩增反应混合液的准备，以及离心

管，吸头等消耗品的贮存和准备。

2，标本制备区：核酸（RNA,DNA）提取，

贮存及其加入至扩增反应管。对于涉及临床标本

操作，应符合生物安全二级实验室防护设备，个

人防护和操作规范的要求。

2，标本制备区。

（1）2~8冰箱，-20℃或-80℃冰箱。

（2）高速离心机。

（3）混匀器。

（4）水浴箱或加热模块。

（5）微量加样器（覆盖0.2~1000ul）。

（6）可移动紫外灯（近工作台面）。

（7）生物安全柜。

（8）消耗品：一次性手套，耐高温处理的离

心管和加样器吸头（带滤芯）。

（9）专用工作服和工作鞋（套）。

（10）专用办公用品。

（11）如需处理大分子DNA，应当具有超声

波水浴仪。

3，扩增区。

（1）核酸扩增仪。

（2）微量加样器（覆盖0.2~1000ul），（视情

况定）。

（3）可移动紫外灯（近工作台面）。

（4）消耗品：一次性手套，耐高温处理的离

心管和加样器吸头（带滤芯）。

（5）专用工作服和工作鞋（套）。

（6）专用办公用品。

4，扩增产物分析区。

（1）微量加样器（覆盖0.2~1000ul）。

（2）可移动紫外灯（近工作台面）。

（3）消耗品：一次性手套，耐高温处理的离

心管和加样器吸头（带滤芯）。

（4）专用工作服和工作鞋（套）。

（5）专用办公用品。

上述各区域仪器设备配备为基本配备，实验室

应当根据自己使用的扩增检测技术或试剂的特

点，对仪器设备进行必要的增减。

二，临床基因扩增检验实验室工作基本原则

（一）进入各工作区域应当严格按照单一方向

进行，即试剂储存和准备区→标本制备区→扩增

区→扩增产物分析区。

（二）各工作区域必须有明确的标记，不同工

作区域内的设备，物品不得混用。

（三）不同的工作区域使用不同的工作服（例

如不同的颜色）。工作人员离开各工作区域时，

不得将工作服带出。

（四）实验室的清洁应当按试剂贮存和准备区

→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区的方

向进行。不同的实验区域应当有其各自的清洁用

具以防止交叉污染。

（五）工作结束后，必须立即对工作区域进行

清洁。工作区的实验台面应当可耐受诸如次氯酸

钠的化学物质的消毒清洁作用。实验台面的紫外

照射应当方便有效。由于紫外照射的距离和能量

对去污染的效果非常关键，因此可使用可移动紫

外灯（254nm波长），在工作完成后调至实验台

上60~90cm内照射。由于扩增产物仅几百或几

十碱基对（bp），对紫外线伤害不敏感，因此紫

外照射扩增片段必须延长照射时间，最好是照射

过夜。

（六）实验室的安全工作制度或安全标准操作

程序，所有操作符合《实验室生物安全通用要求》

（GB19489-2008）。

三，临床基因扩增检验实验室各区域工作注意事项

（一）试剂储存和准备区。贮存试剂和用于标

本制备的消耗品等材料应当直接运送至试剂贮

存和准备区，不能经过扩增检测区，试剂盒中的

阳性对照品及质控品不应当保存在该区，应当保

存在标本处理区。

（二）标本制备区。由于在样本混匀，核酸纯

化过程中可能会发生气溶胶所致的污染，可通过

在本区内设立正压条件，避免从临近区进入本区

的气溶胶污染。为