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qpcr常见问题解答.docx

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qpcr常见问题解答

一般来讲,进展real-timeqPCRMasterMix都是2×的浓缩液,只需要参加模板和引物就可以。由于real-timeqPCR灵敏度高,所以每个样品至少要做3个平行孔,以防在后面的数据分析中,由于Ct相差较多或者SD太大,无法进展统计分析。通常来讲,反响体系的引物终浓度为100-400mM;模板假设是总RNA一般是10ng-500,假设cDNA,通常状况下是1ul或者1ul的10倍稀释液,要依据目的基因的表达丰度进展调整。固然这些都是阅历值,在操作过程中,还需要依据所用MasterMix,模板和引物的不同进展优化,到达一个

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