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基于荧光标记二抗的免疫组织化学检测的质量控制规范
1范围
本文件规定了基于荧光标记二抗的免疫组织化学技术的实验基本要求、检测前准备、检测过程、
质量管理等技术要求。
本文件适用于指导病理实验室规范开展基于荧光标记二抗的免疫组织化学检测。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用
文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)
适用于本文件。
GB/T2985生物显微镜
GB/T11446.4电子级水电阻率的测试方法
GB/T11446.8电子级水中总有机碳的测试方法
GB/T11446.9电子级水中微粒的仪器测试方法
GB/T11446.10电子级水中细菌总数的滤膜培养测试方法
GB15066不锈钢压力锅
GB19781医学实验室安全要求
GB/T23128电磁灶
GB/T29791.2体外诊断医疗器械制造商提供的信息(标示)第2部分:专业用体外诊断试
剂
YY/T1244体外诊断试剂用纯化水
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
免疫组织化学immunohistochemistry;IHC
免疫细胞化学immunocytochemistry;ICC
利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记在抗体上的显色物质(荧光素、酶、
金属离子、同位素、色原体)显色来检测组织细胞抗原,对其进行定位、定性及半定量检测的技术。
[来源:YY/T1181―2021,3.1]
3.2
1
组织固定tissuefixation
将组织浸入适宜的固定剂,使细胞和组织内的物质尽可能保持在其生活状态时的形态、结构和
位置的过程。
3.3
抗体antibody
由免疫原性物质刺激B-淋巴细胞产生,并能与免疫原性物质结合的特异性免疫球蛋白。
注:免疫原性物质的分子包含一种或多种带有独特化学成分的部分,即表位。
[来源:YY/T0639―2019,3.1]
3.4
抗原antigen
在免疫学中,凡能刺激机体免疫系统产生抗体,并能与其相应抗体发生特异性反应的物质。
3.5
抗原修复antigenretrieval;AR
将甲醛固定时对组织蛋白内或蛋白之间形成的交联打开,使之恢复到原有空间状态的过程。常
用的方法包括酶修复法和热修复法。
3.6
荧光标记二抗fluorescencelabeledsecondaryantibody
将荧光基团耦联于二抗,即为荧光标记二抗。荧光标记二抗具有特征性吸收和发射光谱,可以
通过观察其在不同波长下荧光的强度来判定染色结果。常见的荧光基团包括FITC、罗丹明
(Rhodamine)、德克萨斯红(TexasRed)、藻红蛋白或藻胆色素蛋白(Phycoerythrin,PE)、菁类染
料(Cyaninedyes,Cy)系列等。
3.7
阴性对照negativecontrol
不含已知目的抗原的组织或细胞切片。
[来源:YY/T1181―2021,3.4]
3.8
阳性对照positivecontrol
含有已知目的抗原的组织或细胞切片。
[来源:YY/T1181―2021,3.5]
4缩略语
FITC:荧光素5-异硫氰酸酯(fluoresceinisothiocyanate)
EDTA:乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraaceticacid)
EDTA-Tris:三羟甲基氨基甲烷-乙二胺四乙酸缓冲液(ethylenediaminetetraaceticacid-
trishydroxymethylaminomethane)
PBS:磷酸盐缓冲液(phosphatebuffersa
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