基于iTRAQ技术探讨复方钩藤降压片干预自发性高血压大鼠心肌组织差异蛋白的研究.pptxVIP

基于iTRAQ技术探讨复方钩藤降压片干预自发性高血压大鼠心肌组织差异蛋白的研究汇报人：2024-01-21

引言材料与方法结果与分析讨论结论与展望contents目录

01引言

高血压是一种常见的心血管疾病，其发病机制涉及多种因素，包括遗传、环境、生活习惯等。心肌组织差异蛋白在高血压发生发展中起重要作用，如参与心肌肥厚、纤维化等病理过程。研究心肌组织差异蛋白有助于深入了解高血压的发病机制，为高血压的诊断和治疗提供新的思路和方法。010203高血压与心肌组织差异蛋白

iTRAQ技术在蛋白质组学研究中的应用030201iTRAQ技术是一种基于质谱的定量蛋白质组学技术，具有高灵敏度、高分辨率和高通量等优点。iTRAQ技术可用于研究不同生理或病理状态下蛋白质的表达差异，揭示蛋白质在生命活动中的作用和调控机制。在心血管疾病研究中，iTRAQ技术已被广泛应用于研究心肌组织、血清等样本中蛋白质的表达变化，为心血管疾病的诊断和治疗提供重要依据。

本研究旨在利用iTRAQ技术探讨复方钩藤降压片对自发性高血压大鼠心肌组织差异蛋白的影响，揭示复方钩藤降压片治疗高血压的作用机制。本研究的结果将为高血压的发病机制和治疗策略提供新的见解，有助于推动心血管疾病领域的科学研究和临床实践的发展。通过研究复方钩藤降压片对自发性高血压大鼠心肌组织差异蛋白的调控作用，为高血压的药物治疗提供新的思路和方法，同时为中药复方制剂的研发和应用提供科学依据。研究目的与意义

02材料与方法

实验动物与分组实验动物选用健康雄性自发性高血压大鼠（SHR），周龄12-14周，体重200-250g。分组将SHR随机分为复方钩藤降压片干预组（n=10）和模型对照组（n=10）。

复方钩藤降压片由钩藤、天麻、石决明等中药组成，按照一定比例混合后制成片剂。药物制备干预组大鼠每天灌胃给予复方钩藤降压片，剂量为1.0g/kg体重，连续给药4周；模型对照组给予等量生理盐水。给药方法复方钩藤降压片给药方案

VS给药结束后，处死大鼠并迅速取出心脏，剪取左心室心肌组织，用生理盐水漂洗干净。样本处理将心肌组织切成小块，放入液氮中速冻后保存于-80℃冰箱备用。样本采集心肌组织样本采集与处理

iTRAQ标记与质谱分析从冻存的心肌组织中提取蛋白质，采用BCA法进行蛋白质定量。iTRAQ标记将蛋白质样品进行还原烷基化处理，然后用iTRAQ试剂进行标记。干预组和模型对照组分别标记为不同质量的同位素标签。质谱分析采用高效液相色谱串联质谱仪（LC-MS/MS）对标记后的蛋白质样品进行分离和鉴定。通过比较不同组别间蛋白质的相对丰度，筛选出差异表达的蛋白质。蛋白质提取

03结果与分析

心肌组织差异蛋白鉴定结果通过iTRAQ技术，成功鉴定出复方钩藤降压片干预自发性高血压大鼠心肌组织的差异蛋白。02与对照组相比，复方钩藤降压片干预组大鼠心肌组织中共鉴定出显著差异蛋白128个，其中上调蛋白76个，下调蛋白52个。03差异蛋白主要涉及能量代谢、细胞凋亡、氧化应激、炎症反应等生物过程。01

差异蛋白功能注释与分类对差异蛋白进行功能注释，发现其主要涉及细胞代谢、信号转导、细胞骨架、转录调控等生物过程。根据功能分类，差异蛋白可分为代谢相关蛋白、信号转导相关蛋白、细胞骨架相关蛋白、转录调控相关蛋白等。其中，代谢相关蛋白占比最大，主要涉及能量代谢和物质代谢过程。

构建差异蛋白相互作用网络，发现多个关键节点蛋白，如ATP合成酶、细胞色素c氧化酶等。这些关键节点蛋白在网络中具有较高的连接度，提示其在复方钩藤降压片干预自发性高血压大鼠心肌组织中的重要作用。通过网络分析，还发现一些新的相互作用关系，为深入研究复方钩藤降压片的药理作用提供了线索。差异蛋白相互作用网络分析

关键差异蛋白的筛选与验证010203根据差异倍数、功能注释和相互作用网络分析结果，筛选出10个关键差异蛋白进行后续验证。采用Westernblot和实时荧光定量PCR等方法对关键差异蛋白进行表达验证，结果显示这些蛋白在复方钩藤降压片干预组大鼠心肌组织中的表达水平与iTRAQ鉴定结果一致。进一步的功能实验表明，这些关键差异蛋白与复方钩藤降压片的降压作用密切相关，为揭示其药理作用机制提供了重要依据。

04讨论

降低心肌组织氧化应激水平复方钩藤降压片能够降低自发性高血压大鼠心肌组织中的氧化应激水平，减少氧化应激对心肌组织的损伤。调节心肌组织能量代谢复方钩藤降压片能够调节自发性高血压大鼠心肌组织的能量代谢，提高心肌组织的能量利用效率。改善心肌组织病理变化复方钩藤降压片能够减轻自发性高血压大鼠心肌细胞的肥大和间质纤维化，改善心肌组织病理变化。复方钩藤降压片对自发性高血压大鼠心肌组织的影响

参与血管活性物质代谢关键差异蛋白可能参与血管活性物质的代谢过程，如肾素-血管紧张素系统、内皮素系统等，从