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ICS11.220
CCSB41
团体标准
T/CVMA168—2024
鸡传染性支气管炎病毒QX型荧光RT-PCR
检测方法
Real-timeRT-PCRfordetectionofinfectiousbronchitisvirusgenotype
QX
2024-7-4发布2024-7–4实施
中国兽医协会发布
T/CVMA168—2024
前言
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由中国兽医协会提出并归口。
本文件起草单位:中国农业大学、北京亿森宝生物科技有限公司、成都海关技术中心、重庆市动物
疫病预防控制中心、四川省动物疫病预防控制中心、北京市动物疫病预防控制中心。
本文件主要起草人:张国中、王新杰、林华、杨慧明、赵静、赵烨、孙晓明、高姗姗、张棕瑶、安
微、曾政、骆璐、陈忠琼、凌洪权、裴超信、陈斌、王慧强,梅力。
I
T/CVMA168—2024
鸡传染性支气管炎病毒QX型荧光RT-PCR检测方法
1范围
本文件描述了鸡传染性支气管炎病毒QX型荧光RT-PCR检测方法。
本文件适用于鸡咽喉拭子及气管、肺脏、肾脏、输卵管等组织中鸡传染性支气管炎病毒QX型的核
酸检测。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本
文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4缩略语
下列缩略语适用于本文件。
bp:碱基对(basepair)
DEPC:焦炭酸二乙酯(Diethylpyrocarbonate)
IBV:鸡传染性支气管炎(InfectiousBronchitisVirus)
PBS:磷酸盐缓冲液(PhosphateBufferSolution)
PCR:聚合酶链式反应(PolymeraseChainReaction)
RNA:核糖核酸(RibonucleicAcid)
5原理
在PCR反应体系中,除采用特异性的引物外,同时加入与DNA双链非特异性结合的SYBRGreen
I荧光染料。当它与DNA双链结合时,发出荧光,从DNA双链上释放出来时,荧光信号急剧减弱。
随着PCR反应的进行,每经过一个循环,收集一次荧光强度信号,这样就可以通过荧光强度变化监测
产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线。
6试剂和引物
1
T/CVMA168—2024
除另有规定外,所有试剂均为分析纯,实验用水应符合GB/T6682中相关规定。PCR检测引物见附
录A,阴性对照和阳性对照见附录B。
7仪器用具
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