皮肤科范式转变：共焦距激光扫描显微镜在临床皮肤科和外科的应用.pdfVIP

皮肤科范式转变：共焦距激光扫描显微镜在临床皮肤科和外科的应用

SALVADORGONZALEZ，MD，PhD

KIRSTYSWINDELLS,MD

MILINDRAJADHYAKSHA,PhD

ABELTORRES,MD

摘要：

皮肤科和皮肤病理科目前的工作方法是从患者身上获取组织经处理和染色后，对病检组织进行诊断。

这种方法需要对微细组织进行高分辨率观察，存在一定程度的风险和弊端。如今的图像技术可对患者的皮

损进行在体、无创、高分辨率的实时成像。在这些检查方法中，与常规组织学检查相比，共聚焦显微镜模

式提供了最高分辨率的图像。可以做到真正的无创，在自然、动态的状态下观察皮肤。这篇文章对用于皮

肤科和皮肤外科的在体共焦距成像原理进行了综述。

如今皮肤科使用的许多诊断方法都依赖于切除皮不会因为对样品的处理或染色受到影响，减少了伪像形

肤组织后经处理进行病理组织的显微成像。此方法现在成。实时收集到的数据要比传统的组织学检查更加省

已经发展为一种很成熟的技术了，可提供皮肤组织高分时，同一皮肤检查部位可在不同时间段多次成像，以观

辨率的细胞和亚细胞水平的精细结构。然而此方法需要察其动态的变化，如病变区域对治疗的反应。

做皮肤组织活检，活检术给患者带来了痛苦，费时，医共聚焦激光扫描显微镜工作原理为使用一个点光

疗成本增加，而且只能得到切除后的组织信息，存在疤源照射皮肤组织，在组织内照射产生一个小光斑。然后

痕形成和感染的风险。传统的活检需要对活检的样本进将反射光通过一个针孔后在探测器上成像。针孔阻挡了

行处理和染色，这样有可能导致样本失真。非聚焦光到达探测器上。这也表明了只有标本区域的聚

近期影像技术的发展为无创性、高分辨率、在体皮焦光能被探测到。形成需要观察样本的完整图像，通过

肤成像提供了发展空间，避免了活检后做病理检查的不点光源束扫描完成，得到一个在体的、超薄的水平方向

足之处。这些进展包括光学相干断层扫描仪、高频超声组织的虚拟切片。RCM的分辨率取决于针孔大小，光学

皮肤诊断仪，磁共振成像和激光共聚焦显微镜（RCM）。显微镜的数值孔径，以及所使用的波长。使用不同波长

上述各种方法中，与传统的病理组织学的检查方法相的激光作为共聚焦激光扫描显微镜的光源。激光波长数

比，RCM提供的图像分辨率最高。值大时，对皮肤的穿透性强，但是横向分辨力降低了。

共聚焦激光扫描显微镜的工作原理因为当组织中折射率在同一点有所差异时，以及当组织

结构产生的反射光与照射光照波长大小相似时，就产生

MarvinMinsky于1955年在哈佛大学作博士后研究了光的后向散射。如实验室中所使用的近红外光波长

员时发明了共聚焦激光扫描显微镜。然而，这一新技术（800-1064nm）照射黑色素后能产生较强的后向散射，

还需要相应的光源和计算机技术，才能使在体组织成像虽然黑色素对该波长的吸收较强，其形成原因是黑素周

检查得以实现。自上个世纪80年代以来，有几个科研围的表皮组织的折射率高，近似与照明光波长。这表明

组织展示了如何使用经串联后的共聚焦激光扫描显微含黑色素的细胞，如基底角质形成细胞和黑素细胞成像

镜在人体和动物组织进行在体成像。于1995年最先报时折射强。而与之相反的是，皮肤或色素性病变经照射

告了共聚焦激光扫描显微镜用于皮肤组织在体成像。相成像后图像亮度低。

比于传统病理组织检查，在体RCM检查有以下几个优

势：无痛、非创、活检组织不受损。皮肤组织检查结果