色谱法方法验证的操作过程和技术要点说明 .pdf

色弼法方法验瓶操作苞程和技术要点说明

研

究

内

容

操作过程技术要点说明

方目标优化梯度条件，确定分析1、一般在无参考标准或标准的方法无法直

法

摸

波长。接套用时，需进行此项研究内容，如3类药。

索

优

2、样品溶剂：对样品有很好的溶解能力，

化1、样品溶剂选择；实验室自然放置稳定存放12小时以上，与

流动相有好的互溶效果。

3、续滤液峰面积达稳定最大值，续滤液体

2、滤膜吸附试验；积在5ml以下时较为适宜，否则需要重新筛

选溶剂。

4、破坏程度10%左右（5%—15%）为宜,2mol/l

酸或碱90笆水浴12小时无破坏即视为样品

稳定，不必再追求降解度。45001X光照48

3、DAD检测器下，波长选择

小时，样品粉末及溶液需要同时做。破坏后

主成分最大吸收或平台处。

的样品溶液及空白溶剂均需调整至流动相

pH方可进样，可避免对色谱柱产生不影

响。如果破坏超过20%,需要降低破坏条件。

5、分离度好，测定无干扰，各峰峰纯度

4、分离条件选择；

符合单峰要求。

5、色谱柱对比；（）根据情6、梯度变化要有最高洗脱能力过程，目的

况酌定）证明所有的杂质成分均能够被洗脱检测。

6、DAD检测器下,水、lmol/1

酸、碱、氧（10%双氧水）、7、方法摸索优化实验一般是不上资料的，

光照、高温破坏，各起始物料，只是体现在实验记录本中，除非是没有方法

中间体，辅料（制剂研究时需依据时，如3类药申报时，梯度选择及波长

同时进行空白辅料破坏）等成选择等均需要在资料中体现。

分分离。

8、方法优化完成后，最后在同一天同一人，

用同一台机器，对所有样品进行分析测定，

具有可比性。

9、方法摸索优化实验采用工艺已经确定的

实验室小试、实验室放大样品进行，前期用

于原料合成样品配合检测时，可以采用大范

围的梯度洗脱进行模糊检测分析。

专目的为了验证方法对目标成

属1、参照上述过程进行破坏样品制备，空白

性

分检测的区分能力及全面的

及阴性样品都要做。

杂质分析评价。