脓汁和粪便标本中病原菌的检测专题知识讲座专家讲座.pptx

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斜面培养物4支,营养肉汤4支,生理盐水2支,

镜油瓶、拭镜纸1套,吸水纸1本,载玻片4张。;染色瓶6组,染色架8个。;医学微生物学试验

综合性试验一;斜面培养物观察;细菌染色法;结核分枝杆菌

抗酸染色;革兰染色法GramStaining

革兰染色法是丹麦内科医生ChristainGram于1884年创建一个细菌染色方法,已经有120多年历史,仍在广泛使用,是细菌学中最为经典染色法。;革兰染色法原理三种学说;革兰染色意义

判别细菌:把细菌分成G+和G-两大类。

选择抗菌药品:G+球菌对青霉素敏感,G-杆菌耐药。

了解细菌致病机理:G+菌大多产生外毒素,G-菌产生内毒素。

革兰染色步骤

涂片→干燥→固定→染色;接种环取生理盐

水3~4ul,2滴。;;革兰染色方法步骤;革兰阳性菌革兰阴性菌;G+链球菌;液体培养基接种BrothTransfer

—悬浮法SuspendingMethod;生物安全警告;显微镜油镜使用P13;100倍浸油物镜使用方法;温馨提醒;革兰染色法P15

甲→黄色,紫黑乙→黄色,紫黑

丙→白色,粉红丁→白色,粉红

肉汤接种法P10

甲→黄色乙→白色

丙→紫黑丁→粉红

油镜使用P13

10×物镜→看到标本→滴加香柏油→100×油镜→浸泡油中→含糊物象→细调整调焦,观察物像→统计结果→关闭电源→擦镜纸拭去香柏油→擦镜纸沾少许乙醇和乙醚(7:3)混合液擦拭→擦镜纸擦拭油镜。

聚光镜孔径光阑环上物镜倍率(10×或100×)必须转到正面。;思索题;;试验小结

用普通平板,从浓汁标本中分离得到黄色、白色两种菌落,这两株细菌,显微镜油镜下均为G+球菌,排列不规则,呈葡萄串状,是经典葡萄球菌。结合菌落色素,这两株葡萄球菌可能是金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌。;葡萄球菌三个种判别;

用伊红美蓝平板,从粪便标本分离、取得紫黑色和粉红色半透明两种菌落。紫黑色菌落可能是能分解乳糖非致病菌大肠埃希菌。粉红色菌落是不能分解乳糖致病菌。显微镜下,均为G-杆菌,散在排列,从形态上不能判别是什么细菌。;惯用器材摆放次序:电源插座→试管架→酒精灯→污物盘。

试管架上器材:靠近插座一侧第1列放置接种针,第2列放置

接种环,另一侧中???两行放置油性笔和打火机。;试验器材整齐有序;革兰染色瓶

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