基因工程概论.pdfVIP

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一、简述基因研究所取得主要成就,及其与基因工程创立与发展的关系。

1、基因学说的创立

孟德尔提出遗传因子学说到后来的摩尔根染色体理论,揭示了在染色体上基因的线性排列。

2、DNA是遗传物质

从Avery的细菌转化实验到沃森和克里克揭示了DNA的双螺旋模型及半保留复制机理,表明

DNA是遗传物质。

3、DNA是基因的载体

4、基因是细胞中RNA及蛋白质的蓝图“”。

5、随着中心法则的提出和64种密码子的破译,基因碱基顺序与蛋白质氨基酸顺序得到对应。

6、随着基因克隆和DNA序列分析技术的发展,人们对基因的分子结构有了进一步的认识。

7、随着操纵子模型的提出,人们对基因的表达调控有了进一步的认识。

8、随着基因分离与克隆技术的不断改良与发展,基因组文库、cDNA文库、分子探针、PCR

等技术不断被人们运用。

9、目前,不仅能够分离天然基因,还能结合化学合成等方法,在实验室内进行基因的合成、

构建,并进行相应的表达分析。

基因工程是在分子生物学和分子遗传学等学科综合发展的基础上诞生的一门新兴学科,它的

创立和发展,直接依赖于基因及其分子生物学研究的进步,基因及其研究为基因工程的创立奠定

了坚实的理论基础。

二、基因工程建立的三大理论基础和技术条件是什么?并简述其在基因工程中的应用。

1、三大理论基础:

(1)1940年艾弗里(O.Avery)等人通过肺炎球菌的转化试验证明了生物的遗传物质是DNA,

而且证明了通过DNA可以把一个细菌的性状转移给另一个细菌;

(2)1950年沃森(J.D.Watson)和克里克(F.Crick)发现了DNA分子的双螺旋结构及DNA

半保留复制机理;

(3)1960年关于遗传信息中心法则的确立。

2、三大技术条件:

(1)限制性内切核酸酶和DNA连接酶的发现;

(2)基因工程载体;

1

(3)大肠杆菌转化体系的建立。

3、应用:

通过限制性内切核酸酶和DNA连接酶,可以将切割得到的目的基因与载体连接在一起,经由

大肠杆菌转化体系增值复制,为基因工程的后续研究提供基础材料。

三、什么是植物基因工程?什么是转基因植物?两者的关系如何?转基因作物对社会和经济

发展的意义主要有哪些?

1、植物基因工程:用人工的方法,从不同生物中提取外源基因片段及载体DNA,经过体外切

割、拼接和重组,然后采取某种方法,把重组后的带有外源基因的载体DNA引入植物细胞,并使

其在植物细胞内进行复制和表达,以达到预期的改变受体植物细胞遗传特性的目的,此种过程即

称为植物基因工程。

2、转基因植物:转基因植物是拥有来自其他物种基因的植物。该基因变化过程可以来自不同

物种之间的杂交,但今天该名词更多的特指那些在实验室里通过重组DNA技术人工插入其他物种

基因以创造出拥有新特性的植物。通过植物基因工程中的重组DNA技术可以获得多种类型的转基

因植物。

3、利用现代基因工程培育的转基因作物不仅克服了传统育种技术的种种局限性,大大提高了

转基因的效率,加快了种质改良进程,而且打破了物种间的遗传壁垒,拓展了新品种研发可选择

的特征范围,同时人工设计加工基因的应用则更进一步扩大了可利用的种质资源。转基因作物是

人类按自己的主观意愿有目的、有计划、有根据、有预见地进行遗传修饰过的生物体,是现代生

命科学发展的结晶,是人类从认识自然到改造自然的跃迁,标志着人类社会已经步入定向驾驭生

物遗传改良的新时代。转基因作物将在彻底解决资源匮乏、环境恶化、顽症肆虐、粮食短缺等诸

多威胁人类生存的难题上成为关键技术和支柱产业。

四、植物基因工程的主要环节有哪些?每个环节的主要任务是什么?

1、从供体生物分离克隆目标基因

(1)目标基因的遗传学研究、分子标记定位,或目标基因编码蛋白的纯化与测序;

(2)构建基因组或cDNA文库;

(3)获得目标基因的探针或引物信息;

(4)标记探针,筛选文库获得目标基因,或直接通过PCR扩增目标基因;

2

(5)目标基因克隆到质粒载体,转化大肠杆菌,目标基因的测序和分析;

(6)目标基因及其编码蛋白的进一步功能验证和分子

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