第三讲-量子点荧光探针.pptVIP

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*前驱体稳定剂:巯基乙酸、巯基乙醇、2-硫代二乙醇、左旋半胱氨酸等形成的量子点类型:CdSe传统核型,CdSe-CdS核-壳型,CdTe-CdS-ZnS核-壳-壳型,Eu掺杂CdSeie:在绝氧的条件下,向以巯基乙酸为稳定剂的CdCl2溶液中引入H2Te气体,通过高温或微波,使量子点快速成核及生长。阳离子:Zn2+、Cd2+等;阴离子:Te2-、Se2-等。*量子点的表面修饰与生物功能化1、使用双功能试剂,与量子点表面金属离子配合*3、对量子点表面进行硅烷化处理,并嵌入可与生物分子连接的官能团2、表面修饰有三正辛基氧化磷(TOPO)的量子点先与双亲聚合物的疏水长链以疏水作用力相结合,再通过聚合物的亲水基团与生物分子连接*4、在量子点表面修饰带负电荷的基团,通过电荷作用力与带正电的生物分子结合5、将量子点并入带空隙的微珠或纳米级的微球中,形成胶囊,再通过双功能试剂将微球与生物分子连接*生物成像荧光免疫分析生物芯片生物传感器基于FRET研究生物分子间作用*WuX,LiuH,LiuJ,NatBiotechnol,2003,21(1):41-46Wu等将CdSe/ZnS量子点与羊抗鼠IgG或链霉素结合,并将其作为二抗与抗Her2的单体克隆抗体进行免疫反应,从而实现乳腺癌细胞的特异性检测。QDs用于生物成像技术*a.PEG-coatedCdSe/ZnS量子点标记的小鼠肺部:血管、肿瘤细胞、肿瘤中的血管和淋巴管b.近红外荧光QDs被前哨淋巴结吸收。组织成像KimS,LimYT,SolteszEG.Nat.Biotechnol.2004,22:93-97*c.包含各种量子点的不同颜色的微珠被注射到小鼠体内用于活体成像d.用连接有抗体的红色量子点进行小鼠活体内前列腺癌细胞的特异性标记和成像XGao,ML.Richard,ShumingNie.Nat.Biotechnol,2004,22:959-960活体成像*QDs用于免疫分析是临床医学上鉴别某些生物标志的重要生物技术手段。同时分析多种荧光物质有机荧光染料?量子点量子点与免疫球蛋白IgG结合,再捕捉抗原*GoldmanER,ClappAR,AndersonGP.AnaLChem,2004,76(3):684Goldman等人用四种不同颜色的量子点分别于抗霍乱毒素、蓖麻毒素、志和菌毒素1和葡萄球菌肠毒素B的抗体偶联,在一个微孔板上实现了四种毒素的同时检测。*QDs应用于生物芯片技术

量子点色彩的多样性满足了对生物高分子(蛋白质、DNA)所蕴含海量信息进行分析的要求将聚合物和量子点结合形成聚合物微珠,微珠可以携带不同尺寸(颜色)的量子点,被照射后开始发光,经棱镜折射后传出,形成几种指定密度谱线(条形码),这种条形码在基因芯片和蛋白质芯片技术中有光明的应用前景。*CdSe/ZnS与有机磷水解蛋白(OPH)通过静电作用偶联,测定对氧磷。QDs应用于生物传感器*XJi,JZheng,K.R.Vipin,M.L.Roger.J.Phys.Chem.B,2005,109,3793-3799*QDs基于FRET研究生物分子间相互作用1)能量供体的发射光谱与能量受体的吸收光谱必须重叠;2)能量供体与能量受体的荧光生色团必须以适当的方式排列;3)能量供体、能量受体之间必须足够接近,这样发生能量转移的几率才会高发生FRET的条件:*CZhang,L.W.Johnson,Anal.Chem.2009,81:3051–3055*SingleQuantumDot-BasedNanosensorforMultipleDNADetection基于单量子点纳米传感器用于多DNA检测ChunyangZhang,JuanHu.Anal.Chem.2010,82,1921-1927QDs用于DNA检测*传统DNA检测生物传感器单分子检测核酸杂交技术聚合酶链反应操作复杂,条件难控制,耗时长,灵敏度受限制双色重合法双色荧光交联光谱检测单个靶分子底物,荧光光谱重叠干扰*基于单量子点纳米传感器本文根据量子点的宽激发谱带,窄且对称性好的发射谱带,高量子产率,光稳定性好的特点,基于双色同时检测法(two-colorcoincidence)以及荧光共振能量转移(FRET)检测法,在均相体系中的单分子水平下多通道检测HIV-1和HIV-2。纳米传感器是以纳米级

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