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1.简述转座子的发现过程和意义
发现：转座子最初是BarbaraMcClintock于1940年代在玉米的遗传学研究中发现的，当时
称为控制元件。McClintock的发现并没有引起重视，直到20世纪60年代后期，Shapiro在
大肠杆菌中发现一种由插入序列所引起的多效突变，之后又在不同实验室发现一系列可转移
的抗药性转座子，才重新引起人们重视。1983年McClintock被授予诺贝尔生理学与医学奖，
距离她公布玉米调控因子的时间已有32年之久。
意义:
2.请简述基因组DNA的半保留复制是如何证明的
3.简述pull-down与co-IP的基本原理、应用和区别
参见赵珊珊PPT
区别：Co-IP和GSTpull-down的区别
Co-IP和GSTpull-down都是用于检测蛋白相互作用的实验，两者有很多相似之
处，如只能检测强相互作用、只能定量分析、不能检测瞬时相互作用等。同时两
者在原理及实验操作上也存在一定的区别，下文就Co-IP和GSTpull-down在原
理及操作流程上的区别做一简述。
Co-IP和GSTpull-down原理区别
GSTpull-down方法的基本原理是：利用重组技术将探针蛋白与GST融合，融合
蛋白通过GST与固相化的载体上的GTH亲和结合。因此，当与融合蛋白有相互作
用的蛋白通过层析柱时或与此固相复合物混合时就可被吸附而分离。
免疫共沉淀（Co-IP）原理为用某一蛋白的抗体，在细胞裂解液中与相应的蛋白
（诱饵蛋白）结合，用ProteinA/G将抗原抗体复合物拉下，最后在拉下的复合
物中检测是否存在与诱饵蛋白相结合的目的蛋白。
Co-IP和GSTpull-down实验操作区别
Co-IP实验为体内实验条件，蛋白质的相互作用可以在天然状态下进行，其优点
为可以避免人为影响，还可以分离得到天然状态下相互作用的蛋白复合体，缺点
是无法证明两个蛋白之间是直接的相互作用还是间接的相互作用；GST
pull-down实验为外实验条件，可以去除其它蛋白的影响，从而确定目的蛋白和
待检测蛋白是否可以发生直接相互作用。但由于其实验条件为非天然条件，可能
会使实验结果出现假阳性，即因为电荷作用的影响造成的吸附，而不是生理性的
相互作用。
4.举例说明真核生物是如何调控其转录因子的活性的。
5.Youarehelpinganewstudentinalabthatstudiesnematodes.Thestudenthas
generatedengineeredDNAforuseinRNAifromgenomicDNAforageneofinterestto
thelab.Sheispuzzledthattheclonedoesnothaveaneffect,eventhoughsheknows,
basedonavailablemutants,thatlossofthefunctionofthisgenecauseswormstodieas
larvae.YoulookatthesequenceoftheDNAsheusedtomakethefeedingcloneand
discoverthatitcorrespondstoanintroninthegene.Whatwouldyousaytothestudent
toexplainwhyherexperimentdidnotsucceed?（15分）设计的基因插入片段插在了
非编码区（或者内含子里面）导致没有表达出来，解释一下为什么？
6.大肠杆菌在单糖葡萄糖上的增殖速度比在二糖乳糖上的增殖快，这有两个原因：（1）乳糖
吸收的速度比葡萄糖吸收的速度慢；2乳糖必须先水解为葡萄糖和半乳糖（通过β-半乳糖
苷酶），然后才能进一步代谢。当大肠杆菌在含有葡萄糖和乳糖混合物的培养基上生长时，
它以复杂的动力学增殖（图，正方形）。细菌在开始时增殖快于在结束时增殖，并且当这两
个阶段实际上停止分裂时，这两个阶段之间存在滞后。培养基中两种糖浓度的测定表明，葡
萄糖在几次细胞加倍后下降到非常低的水平（图7–1
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