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速测卡法(纸片法)

2原理

胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯(红色)水解为乙酸与靛酚(蓝色),有机磷或氨基

甲酸脂类农药对胆碱酯酶有抑制作用,使催化、水解、变色的过程发生改变,由

此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。

3试剂

3.1固化有胆碱酯酶和靛酚乙酸酯试剂的纸片(速测卡)。

3.2pH7.5缓冲溶液:分别取15.0g磷酸氢二钠[Na2HPO4·12H2O]与1.59g无水

磷酸二氢钾[KH2PO4],用500mL蒸馏水溶解。

4仪器

4.1常量天平

4.2有条件时配备37℃±2℃恒温装置。

5分析步骤

5.1整体测定法

5.1.1选取有代表性的蔬菜样品,擦去表面泥土,剪成1cm左右见方碎片,取5g

放入带盖瓶中,加入10mL缓冲溶液,振摇50次,静置2min以上。

5.1.2取一片速测卡,用白色药片沾取提取液,放置10min以上进行预反应,有

条件时在37℃恒温装置中放置10min。预反应后的药片表面必须保持湿润。

5.1.3将速测卡对折,用手捏3min或用恒温装置恒温3min,使红色药片与白色

药片叠合发生反应。

5.1.4每批测定应设一个缓冲液的空白对照卡。

5.2表面测定法(粗筛法)

5.2.1擦去蔬菜表面泥土,滴2滴~3滴缓冲溶液在蔬菜表面,用另一片蔬菜在

滴液处轻轻摩擦。

5.2.2取一片速测卡,将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。

5.2.3放置10min以上进行预反应,有条件时在37℃恒温装置中放置10min。预

反应后的药片表面必须保持湿润。

5.2.4将速测卡对折,用手捏3min或用恒温装置恒温3min,使红色药片与白色

药片叠合发生反应。

5.2.5每批测定应设一个缓冲液的空白对照卡。

6结果判定

结果以酶被有机磷或氨基甲酸酯类农药抑制(为阳性)、未抑制(为阴性)表示。

与空白对照卡比较,白色药片不变色或略有浅蓝色均为阳性结果。白色药片变为

天蓝色或与空白对照卡相同,为阴性结果。

对阳性结果的样品,可用其它分析方法进一步确定具体农药品种和含量。

7附则

7.1速测卡技术指标

7.1.1灵敏度指标:速测卡对部分农药的检出限见表1。

表1部分农药的检出限

农药名称检出限/农药名称检出限/农药名称检出限/

(mg/kg)(mg/kg)(mg/kg)

甲胺磷1.7乙酰甲胺3.5久效磷2.5

对硫磷1.7敌敌畏0.3甲萘威2.5

水胺硫磷3.1敌百虫0.3好年冬1.0

马拉硫磷2.0乐果1.3呋喃丹0.5

氧化乐果2.32.32.32.32.3

7.1.2符合率:在检出的30份以上阳性样品中,经气相色谱法验证,阳性结果

的符合率应在80%以上。

8说明

8.1葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中,含有对酶有

影响的植物次生物质,容易产生假阳性。处理这类样品时,可采取整株(体)蔬

菜浸提或采用表面测定法。对一些含叶绿素较高的蔬菜,也可采取整株(体)蔬

菜浸提的方法,减少色素的干扰。

8.2当温度条件低于37℃,酶反应的速度随之放慢,药片加液后放置反应的时间

应相对延长,延长时间的确定,应以空白对照卡用手指(体温)捏3min时可以

变蓝,即可往下操作。注意样品放置的时间应与空白对照卡放置的时间一致才有

可比性。空白对照卡不变色的原因:一是药片表面缓冲溶液加的少、预反应后的

药片表面不够湿润,二是温度太低。

8.3红色药片与白色药片叠合反应的时间以3min为准,3min后的蓝色会逐渐加

深,24h后颜色会逐渐退去。

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